Egy specifikus tuberkulózis fertőzés évek óta jelen van az emberi szövetekben és szerkezetekben, és bizonyos körülmények között 2-3 hónap alatt gyorsan terjed a testben. Néha a legjobb kezelési módot nagyon nehéz választani a késői diagnózis és a számos gyógyszerhez való alkalmazkodás miatt.
A tuberkulózis legújabb PCR-diagnózisa nem csak a kialakult betegség, hanem maga a kórokozó kimutatását is lehetővé teszi, amikor a betegség első jelei még nem jelentek meg.
Mi az a PCR?
A tuberkulózis diagnosztizálása a PCR-rel a közelmúltban jelent meg. 1983-ban Amerikából származó mikrobiológus, Cary Mullis, olyan eljárást hozott létre, amellyel a mikroorganizmusokat rövid biológiai anyagból rekonstruálhatjuk egy rövid szegmensben. Ez a munka megkapta a Nobel-díjat.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR egy polimer lánc folyamat, amelyben a vírus patogének diagnosztizálása és kimutatása géntechnológiával történik. A technikát immunológiai, mikrobiológiai, virológiai és biokémiai laboratóriumokban használják.
Az univerzális módszer segít az orvosoknak diagnosztizálni és azonosítani egy fertőző folyamatot még a fertőzés első óráit követően is, a tünetek megjelenése előtt. A kutatás még kis mennyiségű biomedellel is lehetséges.
Mi szükséges az elemzéshez?
- Számos DNS-szegmens (primerek), amelyekkel a biológiai szintézis kezdődik;
- Nukleotid vegyületek, a DNS molekula vagy RNS alapja;
- A polimeráz enzim, amely felgyorsítja a PCR analízist.
Mi a módszer alapja?
Először is, egy DNS-szegmenst egy fertőzött személyből nyerünk ki egy biológiai anyagból, a gén-molekuláris bioszintézis módszerekkel, a mikroorganizmusok típusát, amelyhez a biofragmentum tartozik, tovább határozzuk meg.
Ez a komplex reakció kevesebb időt vesz igénybe, mint néhány biometód. A PCR a kórokozót néhány órán belül határozza meg, míg nincs szükség biológiai folyadékból (köpet, cerebrospinális vagy vérközeg) történő elkülönítésére, ezért nem szükséges hosszú ideig tápközegben termeszteni. Elég, ha a vizsgált anyag egy fertőző kórokozó DNS-szálat tartalmaz.
A tuberkulózis in vitro PCR vérvizsgálatának elvégzése során a mycobacterium tuberculosis ribonukleinsavainak szintézise mesterségesen jön létre.
A diagnózis szakaszai
A PCR-rel történő molekuláris reakció egy egyszerű eljárás, amely kevés időt vesz igénybe. A szükséges biológiai anyagot a vér, a köpet, a hörgőmosó folyadék segítségével határozzuk meg.
- Először a DNS elsődleges formája megsemmisül, 2 láncot különítünk el magas hőmérsékleten (maximum 98 ° C, legfeljebb 2 percig);
- Ezután elvégezzük a hegesztést, a primer hőmérsékletet több osztás csökkenti, a DNS-szálat a primerhez kapcsoljuk;
- A következő szakaszt elongációnak nevezik, a szükséges molekuláris szerkezetek bioszintézisével.
A szükséges DNS-példányszám eléréséhez 25-30 ilyen ciklusnak kell eltelnie, és a kapott mikobaktériumok száma könnyen felismerhető.
Szükség van-e a tuberkulózisra vonatkozó PCR-re?
Közvetlenül minden olyan betegnek, aki gyanús TVC-vel rendelkezik, a láncdiagnosztika nem történik meg, mivel az eljárás költséges berendezések használatát igényli. Nem minden egészségügyi állami intézmény teszi lehetővé, hogy megvásárolják, különösen azért, mert a mycobacterium tuberculosis diagnosztizálásának szokásos módszerei is informatívak.
- Óvatos történelem, a beteg megkérdőjelezése;
- Külső vizsgálat;
- Mantoux tuberkulin teszt;
- Radiográfiai vagy fluorográfiai vizsgálat;
- Szükség esetén számítógépes diagnosztika;
- A maszk mikroszkópos vagy bakteriológiai vizsgálata köpetrel.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-t csak akkor végezzük, ha nem lehetséges egy másik instrumentális elemzés elvégzése, vagy olyan körülmények között, amelyeket nehéz diagnosztizálni.
Annak ellenére, hogy számos diagnosztikai módszert találtak ki, a tuberkulózisban szenvedő betegek száma tovább nő. Ezen túlmenően az előfordulási gyakoriság néhány jellemzőt is megszerzett: a betegség súlyos formáját gyakran megfigyelik, a halálozások száma növekszik, a kórokozó ellenállóvá válik a meglévő kemoterápiás gyógyszerekkel szemben.
Sokan nem akarnak minden évben rutinszerű ellenőrzést végezni, elutasítják az oltást, ami az előfordulási gyakoriság növekedéséhez vezet. Ezek a körülmények hatékony és informatív kutatási módszereket igényelnek a felnőttek és a gyermekek diagnosztizálására. A PCR előnyei vannak más diagnosztikai módszerekkel szemben.
Mi a módszer értéke?
Ez a legújabb kutatás jól bizonyult. Ha több okból is nehéz diagnózist készíteni, vagy néhány ellentmondásos esetben a PCR biológiai anyagban könnyebben észlel egy tubercle bacillust, mint más módszerek.
- Ez a gyors vizsgálat, a molekula kis szegmense lehetővé teszi, hogy rövid időn belül körülbelül 5 órán belül pontos diagnózist készítsünk, ezt sürgős esetekben, például sürgős sebészeti beavatkozás előtt használják fel;
- A tuberkulózis vérvizsgálata akkor lehetséges, ha más módszerek nem állnak rendelkezésre vagy ellenjavalltak - néha a tbc kórokozó kimutatásához sok Rg-felvételt kell készíteni, a sugárzás dózisa pedig túl nagy;
- A polimeráz reakció segítségével bármely biológiai folyadék vizsgálható a mikobaktériumok jelenlétében. Például végezhet tanulmányt a cerebrospinális folyadékról tuberkuláris meningitissel vagy urogenitális tuberkulózissal.
- A módszer biztonságos, a PCR-t használó gyermekeknél a tuberkulózis diagnózisa nem okoz nehézséget;
- A polimer reakció módszere a betegség bármely formáján és stádiumában tuberkulációs bacillust mutat;
- A biológiai anyagban csak néhány baktérium jelenléte lehetővé teszi a mikroorganizmusok jelenlétét, mivel ez érzékeny reakció;
- A PCR könnyen diagnosztizálja a betegség megismétlődését.
Az óriási előnyök ellenére a tbc-vizsgálat gyanúja nem történik meg, mivel vannak hátrányok is, ezeket is figyelembe veszik.
videó
Videó - korai diagnózis
Mi a hátránya?
Ez a diagnosztikai módszer meglehetősen kivételes, mint a természetes, mert ennek oka van. Először is figyelembe veszik a módszer magas költségeit. A berendezés drága, a nyilvános klinikáknak nincs lehetőségük a magas ár miatt megvásárolni, de a legtöbb fizetett laboratórium rendelkezik a felszereléssel, elemzik azokat.
- A módszer kimutatja a kezelés után elhunyt halott baktériumokat, míg a PCR pozitív eredményt mutat. Közvetlenül a kemoterápia után nincs értelme vizsgálatot végezni, mivel az eredmény megbízhatatlan lesz;
- A Mycobacterium tuberculosis mutációk érzékenyek, ami a módszer nem hatékony működéséhez vezet, és a DNS-szálat nem lehet következetesen szintetizálni.
A vizsgálat körülményeit gondosan ki kell választani, a vért és a vizeletet csak akkor lehet összegyűjteni, ha fertőzés gyanúja áll fenn. A sputumot nem szabad vizsgálni, ha a csont-tuberkulózis gyanúja merül fel. Ebben a helyzetben a diagnózis helytelen lesz.
A PCR-rel vizsgálandó tuberkulózisos beteg vérét és vizeletét ritkán veszik figyelembe, így a betegség azonosítása megkérdőjelezhető. Ezekben a biológiai közegekben a kórokozót csak szepszisben, vagy disszeminált tuberkulózis esetén határozzuk meg. A helyi formák a leggyakoribbak, vérük és vizeletük változatlan marad. Leggyakrabban a flegmust vizsgálják.
Ki mutatja az elemzést?
A legtöbb beteg PCR diagnosztizálásra kerül az ellentmondásos és nehéz tuberkulózis esetekben. Mikor adják ki az orvosi szakemberek a kutatást?
- Ha kapcsolatba kerül egy olyan személyrel, akit megbízhatóan diagnosztizáltak tuberkulózissal, de nehéz a hagyományos módszerekkel diagnosztizálni;
- Ilyen körülmények között, ha a beteg a klinikai ellátást nem lehet röntgen- vagy más kutatási célokra elvégezni. Ilyen helyzetben könnyebb megvizsgálni a polimer módszerrel. A sputum analízist egyszerűen egy speciális tartályba juttatják a laboratóriumba, és az eredmény néhány óra múlva ismertté válik;
- A művelet előtt sürgősen meg kell határozni, hogy a beteg tuberkulózisban van-e, és ebben az esetben PCR-t jelez;
- A módszer biztonsága miatt lehetőség van egy terhes nő vagy gyermek felmérésére, anélkül, hogy további röntgenterhelést hoznának létre;
- Kétséges Mantoux vizsgálati eredmények.
Ha a tuberkulózist bakteriológia és fluoroszkópia segítségével nem igazolják, bárki, aki akar, megvizsgálható. Ez akkor fordul elő, ha a tüdőszövet sérülése láthatatlan az Rg-képben közvetlen vetítésben, és a beteg nem tudja helyesen gyűjteni a köpetet, de az emberi tuberkulózis jelei zavarnak.
A sikeres diagnózis kulcsfontosságú a modern PCR-reakció a diagnózishoz, aminek következtében csökken a betegség prevalenciája. A betegségek azonosításának hagyományos módszerei nem mindig eredményezik a kívánt hatást.
Tehát a PCR-elemzés eddig a betegség korai szakaszában a megbízható és biztonságos diagnosztikai módszerek egyikévé vált.
A tuberkulózis PCR-elemzése
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-analízis a legnépszerűbb az orvosi kutatás területén e betegség területén.
De hogyan kell figyelmeztetni magát és szeretteiteket ebből a szörnyű betegségből? Hogyan kell elvégezni a szükséges PCR teszteket?
A tuberkulózis tünetei és megelőzése
A szakértők szerint a teljes népesség mintegy 30% -a szenved tuberkulózisban.
A betegség legnagyobb arányát a fejletlen országokban fejlesztették ki. Ez a leggyakrabban az emberi immunitás csökkenésének következménye.
A betegség az egyik legrégebbi. Ez a betegség az agy bélésében, a tápcsatornában, az ízületekben és a gerincben, a húgyúti rendszerben és az emberi bőrön kis területeken található.
A szakértők a legkönnyebben meghatározzák az érintett bőrt. A helyszínen apró tömítések találhatók, amelyek idővel mérettel nőnek, fehéres folyadékkal törtek ki.
A tuberkulózis okozója leggyakrabban egy beteg emberrel való beszélgetéskor vehető fel, amikor köhögés vagy tüsszentés történik. Általában a betegség tünetek nélkül folytatódik, vagy nyitott formájú, de a tuberkulózis PCR-diagnózisa lehetővé teszi, hogy a betegség korai szakaszában és vészhelyzetben észlelje.
A betegség tünetei: hosszan tartó nedves köhögés, láz, hidegrázás, éjszakai túlzott izzadás, éles tömegvesztés, fáradtság és gyengeségérzés.
A betegség nyitott formája a legveszélyesebb. Egy tuberkulózisban szenvedő személy képes megfertőzni az egészséges embereket.
A tüdőbetegség legfontosabb tünete a hemoptysis. Ez a betegség bármilyen formája.
Bizonyos esetekben ez vérzéshez vezethet egy személy tüdejéből. Nagyon veszélyes, és sürgős orvosi beavatkozást igényel.
A tuberkulózis megelőzésére és elismerésére a szakértők előírják: egy mintát - egy tuberkulin tesztet, biológiai anyag vizsgálatát, fluorográfiát, röntgenfelvételt és vérvizsgálatot, köpet vagy nyál.
A betegség diagnózisa
A betegség diagnózisának javítása - ez a helyes és a kezelés kezdetén. A legtöbb esetben a kórokozók kimutatásának szokásos módszerei nem mindig hatnak, és már elavultak.
A tüdőbetegség azonosításának és diagnosztizálásának legfontosabb módja az orvosi vizsgálat. Általában PCR diagnosztikát használ. A felmérést 1983-ban az amerikai biokémikus Mullis fedezte fel.
A pulmonális tuberkulózisban szenvedő betegek vizsgálatát kizárólag különleges esetekben végezzük, amikor nehéz megállapítani a diagnózist, vagy lehetetlen kimutatni a betegséget műszeres módon.
A polimeráz láncreakció megbízható PCR módszer. Ez az elemzés lehetővé teszi a vér, a vizelet és a gerincvelői folyadékok mennyiségének meghatározását. Az ilyen orvosi vizsgálat a legbiztonságosabb.
A PCR-analízis 100% -os eredményt ad.
Nagy érzékenységgel rendelkezik, amely a fertőzés utáni első órákban felismeri a betegséget, mielőtt a betegség tünetei megjelennek. Ez az elemzési módszer a biológiai anyag szállítását követő néhány órán belül eredményt ad. Ennek az elemzésnek a vetését háromszor végezzük, de a beteg gyomor aspirációját csak a kórházban végezzük.
Az eredmények meghatározására három kritérium került kidolgozásra: nagy pontosság, 90% -os érzékenység, specifitás.
A PCR-tesztet bizonyos esetekben használják:
- a tüdő tuberkulózis diagnosztizálására;
- meghatározza a betegség forrását;
- az extrapulmonális lokalizáció meghatározása;
- az ismétlődés diagnosztizálása.
Értékelje az eredményt, és írja elő a helyes orvosi kezelést, csak szakember. Nagyon fontos, hogy a tuberkulózis kimutatására az orvosi kezelés helyes rendjét hozzuk létre, ezért a kórokozónak a TB elleni eszközökre való érzékenységének vizsgálata szükséges.
Számos tuberkulózis orvosi vizsgálat
A szükséges elemzést kétféleképpen tehetjük meg: a vérből vagy nyálból egy személyt, vagy egy köpet.
A PCR-rel végzett vérvizsgálatok kétféle lehetnek: ELISA és PCR. Egy ilyen tanulmány segít az orvosi kezelés hatékonyságának nyomon követésében.
Az ELISA segít megtalálni az antitesteket az emberi szervezetben, amely ellenáll a tuberkulózis mikrobáknak. Ezt a vizsgálatot naponta egyszer végezzük. A fő hátránya az alacsony érzékenység, ami lehetővé teszi, hogy csak egy alacsony szintű fertőzésű betegséget határozzunk meg.
A legnépszerűbb és leghatékonyabb kutatás a mycobacterium tuberculosis elemzése. Vele, az orvosok könnyen megtalálhatják a baktériumok DNS-jét az emberi vérben. Ezt a módszert alkalmazzák a baktériumok számának meghatározására, a beteg kezelésének szabályozására, a korai ismétlődés kimutatására.
A PCR nyál az egyik legfejlettebb kutatási módszer. Egy ilyen elemzés segít azonosítani a nyálban a fertőző baktériumokat. A PCR használata növeli a káros mikrobák DNS-fragmenseinek számát.
A tenyésztési módszer humán köpet vizsgálatára szolgál, mikrobaktériumok kimutatására.
A PCR tesztelés előkészítése
Figyelem, a PCR-re a nyál megfelelő előkészítéséhez van szükség. Ha az előírások nem teljesülnek, az elemzés hamis pozitív lehet.
A vizsgálat megkezdése előtt tilos a dohányzás, az élelmiszer és a gyógyszerek, valamint az alkohol fogyasztása 12 órán keresztül. Tilos a fogak kefe, az öblítőszer, a szájfrissítő és a fogselyem használata nem lehetséges.
Tilos rúzsot használni és intim kapcsolatokba lépni. Megengedett, hogy öblítse ki a száját sima főtt vízzel;
Ez a vizsgálat segít azonosítani: herpesz, chlamydia, tuberkulózis, tüdőgyulladás kórokozói, onkovírusok, barolleosis, mononukleózis, HIV, mindenféle hepatitis, rubeola.
A mikobaktériumok vizsgálatát főként ellentmondásos esetekben végzik, nevezetesen, ha nehéz diagnózist készíteni, vagy a betegség megkezdése előtt érintkezésbe került egy tuberkulózisban szenvedő pácienssel. Terhes nő vizsgálatára használják, mivel ez a módszer az anyának és a magzatnak a legbiztonságosabb.
Néha az elemzést magánklinikán végezzük, mivel a beteg nem tartotta be a tesztelési szabályokat, ugyanakkor aggódik minden tünet miatt. Az elemzés akkor végezhető el, ha a szakemberek nem biztosak a Mantoux teszt elvégzése után, vagy ha a beteg gyermek.
Az orvosi vizsgálatok előnyei és hátrányai a tuberkulózis meghatározására
A PCR a legnépszerűbb és leghatékonyabb módszer a betegség meghatározására.
A legnagyobb különbség a többi tanulmánytól egy gyors és pontos eredmény.
Ennek az orvosi vizsgálatnak az az előnye, hogy urológiai, nőgyógyászati, onkológiai, fertőző, hematológiai, pulmonáris, gasztroenterológiai és egyéb vizsgálatokban végezhető el.
Az ilyen orvosi vizsgálat fő előnye, hogy a vérvizsgálatok, a köpet és a nyál rövid idő alatt készen áll (a betegség észleléséhez 5 óra lesz). Az ilyen orvosi vizsgálat lehetővé teszi a tesztek elvégzését, ha a betegség tanulmányozásának bizonyos módszerei tilosak vagy hozzáférhetetlenek. Nagyszerű az emberben bekövetkező visszatérések észlelésére.
Ennek az elemzésnek köszönhetően lehetővé vált bármely biológiai környezet kutatása. Megengedett a gyermekektől származó anyagok felvétele. A PCR lehetővé teszi a kórokozó azonosítását a betegség bármely szakaszában. Magas érzékenysége miatt a mikrobák akkor is megtalálhatók, ha csak néhány baktérium van jelen.
A PCR módszer bővíti képességeit. Azt is használják, hogy meghatározzák az apaságot, az új gének előállítását, mutációkat, a DNS-elemek áthidalását, és így tovább.
A tanulmány hátrányai egy drága felmérési módszer.
Az orvosi kezelés után a vérvizsgálat megmutatja az élő vagy halott kórokozók kis mennyiségben történő jelenlétét, orvosi vizsgálat után, pozitív eredményt ad.
A baktériumok és a mikrobák mutáción mennek keresztül, majd a PCR nem lesz képes azonosítani és azonosítani őket, ezért csak egy szakember írhat elő tanulmányt a szükséges környezetről, különben az ilyen orvosi vizsgálat hatástalan lesz.
A vizsgálat után negatív eredmény van, de ez nem zárja ki annak lehetőségét, hogy egy személy fertőzött tuberkulózissal. Az ilyen orvosi vizsgálat súlyos tüdőbetegségben szenvedő betegeknél történik, ha bármely más vizsgálat nem ad pontos eredményt. A PCR a pulmonális és extrapulmonális tuberkulózisban szenvedők számára hasznos lesz.
Sajnos a tuberkulózis kórokozók kimutatására szolgáló orvosi berendezések nagyon drágák.
Az állami kórházak és klinikák nem engedhetik meg maguknak, de a fizetett klinikák a betegvizsgálatokat végzik, és rövid idő alatt kész eredményeket nyújtanak.
A tuberkulózis PCR diagnózisa gyermekek és felnőttek esetében
A modern diagnosztikai módszerek (pcr, diaskintest, quantiferon teszt) nagyon hatékonyak, de a gyakorlatban a vizsgálatokat nem igazolták. A fertőzött és beteg emberek azonosításának alapja a tuberkulin-diagnózis.
A módszer lehetővé tette számos beteg azonosítását, a morbiditás, a mortalitás statisztikáinak csökkentését.
A mikobaktériumok és a köpetmikroszkópia Zill-Nelson szerint történő vetésével lehetővé válik a fertőzés megbízható diagnosztizálása. A probléma a sputum pontos bevételét okozza közvetlenül az érintett bronchusból. A tuberkuláris folyamat hátterében a hörgőfa jelentős része érintett. A bakteriális vetés után lehetőség van a kórokozó antibiotikumra való érzékenységének vizsgálatára.
A diagnózis eredményeinek phtisiatrológusok által történő elemzése után világossá vált, hogy a Koch botjainak kiválasztásának hiánya nem jelenti a fertőzés hiányát a szervezetben. A kórokozót a második, a harmadik, a negyedik bevételi anyag után lehet meghatározni.
A modern diagnosztikai módszerek (dst, Quantiferon teszt) a betegség aktív lefolyásával észlelik a mikobaktériumokat. A nyirokcsomók belsejében lévő mikobaktériumok jelenlétében, a betegség extrapulmonális formáival, a tesztek leggyakrabban negatívak.
Az időszerű diagnózis az alapja a betegség súlyos szövődményeinek és veszélyes következményeinek megelőzésére.
Modern módszerek
A klasszikus tuberkulin diagnózis helyettesítése diaskintest (dst). A legfrissebb előírások szerint a tanulmány helyettesíti a standard Mantoux tesztet, amely lehetővé tette, hogy a lakosság körében számos morbiditási és fertőzési esetet azonosítsanak.
A Diaskintest lényege, valamint a tuberkulin diagnózis magában foglalja a tuberkulózis kórokozóinak fehérjeinek szubkután beadását. Az injekcióra adott válaszként kialakult a túlérzékenységi reakció specifikus bőrváltozásokkal: vörösség, induráció, hólyagosodás.
A Diaskintest pozitív eredménye jellemző a betegség aktív lefolyása esetén. Fertőzés vagy fokozott allergia esetén a vizsgálat negatív lesz. A dst negatív hatása erős immunitás eredménye, de ha egy személy fertőzött.
A Mantu-hoz képest a Diaskintest a tuberkulózis diagnosztizálásának sokoldalúbb és érzékenyebb módja. A fertőzés kimutatásának hiánya a tuberkulin-diagnózissal egyidejűleg történő alkalmazását igényli.
A klinikai vizsgálatok eredményei ellenére a tudósok a módszer általános egyetemességéről és érzékenységéről vitatkoznak, a tanulmány nem tekinthető egyetemes diagnosztikai megoldásnak.
A vizsgálatot Sechenov Kutatóintézet akadémikusai fejlesztették ki. Az allergiák hiányát a diaskintest alkalmazásakor a fajspecifikus tuberkulózisfehérjék szubkután beadása magyarázza. Bevezetésüket a bőrpír, bőrpír, pecsétek alakulása határozza meg.
Mi a quantiferon teszt
A quantiferon tesztet a beteg vérének bevétele után értékeljük. Az eljárás mechanizmusa az, hogy meghatározzuk a gamma-interferont, amelyet a T-limfociták felszabadítanak a mikobaktérium-tuberkulózissal való találkozás után. A tesztek meghatározzák a nemcsak emberi és szarvasmarha-baktériumokat tartalmazó tuberkuláris fehérjéket. A quantiferon tesztet más mikobaktériumok által okozott mikobakteriózisok diagnosztizálására is használhatjuk, amelyek specifikus változásokat képeznek a röntgenfelvételen. A vizsgálati eredményt több kémcsőben határozzuk meg, ami növeli az eljárás diagnosztikai érzékenységét.
PCR a gyermekkori tuberkulózis diagnosztizálására
A polimeráz láncreakció pontos, de költséges módszer a tuberkulózis diagnosztizálására. A PCR-t bronchoszkópia után végezzük.
A negatív eredmények megszerzése után racionális a polimeráz láncreakció végrehajtása. Az eredményeket a Mycobacterium tuberculosis háromszoros köpetes tenyésztése után értékeltük. A legkedvezőbb körülmények között a kórokozó azonosítása fertőzést jelez. A kemoprofilaxis célja, hogy Koch botok jelenlétében elkerülje az aktív tuberkulózis folyamatát.
Mikroorganizmus törzsének beérkezése után lehetséges az antibiotikum-érzékenység beültetése. A mikroorganizmusokat elpusztító antibiotikumok meghatározása lehetővé teszi számunkra, hogy értékeljük a fertőzés kezelésére szolgáló gyógyszereket.
A gyermekek PCR-jét a vetés negatív eredményeivel végezzük, de ha van a tuberkulin-vizsgálat fordulata, a fertőzés röntgen jeleinek vizualizálása, az aktuális fertőzés klinikai tüneteinek kimutatása.
A polimeráz láncreakció nagy pontosságot biztosít (kb. 99%). Az eljárás nukleinsav-amplifikáción alapul. A mikobaktériumok, vírusok és más mikroorganizmusok egyedi nukleotidszekvenciákkal rendelkeznek. A diagnózisuk lehetővé teszi a betegség okozójának azonosítását.
A PCR érzékenysége a gyermekeknél alacsonyabb, mint a felnőtteknél. A gyakorlatban a gyermek polimeráz láncreakciójának alábbi jellemzőit tártuk fel:
- Specifitás - 80-100%;
- Érzékenység - 25-80%.
A módszer nagy pontossága ellenére a negatív eredmény megszerzése nem jelenti a tuberkulózis hiányát a gyermekeknél. A módszer racionálisabb alkalmazása immunhiányos betegeknél. Az extrapulmonális tuberkulózis fertőzés diagnózisában.
A tolmácsolási hibákat a tanulmányi anyagok gyűjtésének és elkészítésének megsértése határozza meg.
A PCR negatív eredményének okai a tuberkulózis diagnózisában
A mikobaktériumok elterjedése a szervezetben limfogén (nyirokereken keresztül) és hematogén (a véráramláson keresztül) biztosítja a sok szövet gyarmatosítását, az extrapulmonális fertőzésfókusz megjelenését.
A tüdőben lévő pusztítás (pusztítás) fókuszainak röntgensugaras meghatározásakor nincs szükség PCR-re. A röntgenfelvételt használó felnőtteknél nagyfokú bizalommal lehet azonosítani a fejlett formákat.
Gyermekeknél a PCR-vizsgálatot gyakrabban használják a nyirokcsomók belsejében található mycobacteriumok látens lokalizációja miatt, ami más diagnosztikai módszerek alkalmazása esetén negatív eredményekhez vezet. A bakteriális tenyészetben elegendő körülbelül 10 mikroorganizmus kimutatása. Ne feledje, hogy nem mindenki felelős az aktív pulmonalis tuberkulózisért.
A PCR, a bakteriális vetés helyes diagnosztizálásához a DST-t követni kell:
- Az anyagot steril csövekben tárolja;
- Távolítsuk el más baktériumok bejutását;
- Szállítás közben tartsa be a személyes higiéniát, hogy megakadályozza, hogy a bioanyag a testre, az arcra és a légutakra esik.
Tárolt vér és tartósítószer EDTA. Az egyes laboratóriumi elemzések során az anyag előkészítésének egyedi jellemzői vannak, amelyekkel a szakértők ismerik.
Innovatív diagnosztikai módszerek
A fertőzés korai felismerése lehetővé teszi a korai kemoprofilaxist, a súlyos betegségek megelőzését.
A klinika gyermekkorban történő törlése, elégtelen vizsgálati eredmények, a minták értékelésének írástudatlan értelmezése nem teszi lehetővé a fertőzés időben történő ellenőrzését. A csecsemők morbiditásának megakadályozásához az eredmények gondos elemzése szükséges, a diagnózis korai szakaszában történő megállapításának lehetőségével.
A tuberkulózis laboratóriumi diagnózisának modern módszere a gyermekeknél - a TAB-TM kimutatása
A „TAB-TM” nevű gyermekekben a T-sejt markerek meghatározására adott reakciót nagy érzékenység jellemzi. A módszer lényege a T-limfociták felszínén lokalizált specifikus differenciálódási klaszter (CD-27) azonosítása. E faktor izolálása után a citokineket citometriával festjük.
A módszert az irodalomban írták le 2014 óta. A megfigyelések eredményei az eljárás nagy érzékenységét mutatják. A TAB-TM meghatározása kifejezett módszer a tuberkulózis sputumvizsgálattal történő diagnosztizálására.
A tuberkulózis vérvizsgálata - ami azt mutatja
A kezdeti szakaszban a tuberkulózisfertőzés specifikus klinikai tünetek nélkül jelentkezik. A gyermekkori laboratóriumi diagnózis akkor válik lehetővé, amikor a Koch pálca szaporodik.
Milyen sejteket értékeltek a tuberkuláris folyamatban laboratóriumi vérvizsgálatban:
- A vörösvérsejtek olyan vörösvérsejtek, amelyek felelősek az oxigén szállítására a szövetekben. A vér vörös csíráinak oldalán a tüdő tuberkulózis könnyű lefolyása miatt nincsenek kóros változások. A romboló fókusz jelenléte hozzájárul a véres vérzéshez. Az állapot a bélfal tuberkulózis gyulladásával alakul ki. A patológia hátterében lévő retikulociták száma több mint 1% -kal nő;
- A leukociták bármilyen fertőzéssel nőnek. A leukocitózist a leukogram balra történő eltolódása kíséri. A szegmentált neutrofilek számának növekedését a kezdeti szakaszban lehet nyomon követni. Súlyos tuberkulózisban, plasztikus fúzióval, immunhiányos állapotokban leukopeniát figyeltek meg (a vérleukociták számának csökkenése). Ugyanakkor növeli a limfociták tartalmát (több mint 20%);
- Az eozinofília a kezdeti szakaszhoz vezethető. Az állapot akkor fordul elő, amikor különböző szervek tuberkuláris infiltrátumai vannak. A felnőttekben súlyos bomlással járó súlyos tuberkulózis az eozinofilek teljes hiányát eredményezi;
- Basophil javítása.
A tuberkulózis laboratóriumi vizsgálata nem specifikus gyermekekre vagy felnőttekre. Az ilyen változások számos bakteriális vagy vírusos fertőzésre jellemzőek.
A hemogram indikátorok a tuberkulózisfertőzés stádiumának meghatározására szolgálnak a TB-szakemberek számára.
Aktív infiltrációval a leukocitózis nyomon követhető a neutrofilek számának növekedése miatt. A sejtekben patológiai szemcsék jelennek meg, ami a vér mérgezését jelzi.
A szétesés központjai az eozinofilek, a neutrofilek, a fiatal formák, a limfociták számának csökkenéséhez vezetnek. A terjesztés során abszolút monocitózis lép fel. A reszorpció hátterében a limfociták és az eozinofilek száma nő.
A központok konszolidálásakor a hemogramot nem a változások jellemzik.
A tuberkulózis gyermekvizsgálata: tuberkulin diagnózis
Hosszú ideig a pthisiatricians színpadra lépett Mantoux reakciót. Az ilyen tuberkulózisvizsgálatok lehetővé tették nemcsak az aktív fertőzés, hanem a fertőzés kimutatását is. A minta lényege a tuberkulin szubkután injekciója volt, amely a szervezet allergiáját okozza. A tészta a Micobacterium Bovis-tól kapott anyagot használt. Szubkután injekció beadása után papulát kapunk, amely tükrözi a szervezet válaszát a mikobaktériumok behatolására:
- Normál papula - 5-16 mm-es méret;
- Reakció hiányában - az immunrendszer gyengülése, a mikobaktériumok hiánya;
- Nagy papulus - a baktériumok antigének jelenléte, érintkezve a tubercle bacilli hordozójával.
A módszer nem tekinthető megbízhatónak a hamis pozitív reakciók nagy száma miatt. Ha megkérdőjelezhető eredményekre van szükség, a megerősítő PCR. A diaskintest (dst) megjelenésével megváltozott a helyzet. A módszerek együttes használata lehetővé teszi a megbízhatóbb eredmények elérését.
Klasszikus "ftisiológiai" módszerek a tuberkulózis diagnosztizálására
A gyerekek és felnőttek tuberkulózisának diagnosztizálására szolgáló phtisiatrológusok a következő vizsgálatokat végzik:
- A beteg előzményeinek vizsgálata (érintkezés a pácienssel vagy a tubercle bacillus hordozójával). A társadalmi kockázati tényezők azonosítása segíthet a lehetséges fertőzésekben;
- A tuberkulin érzékenységének értékelése (Mantoux teszt) PPD tuberkulinnal 5-10 TE dózisban. Az eredmény értékelése 48-72 óra alatt történik;
- A röntgenvizsgálatot gyanús tuberkulózisban szenvedő gyermekeknél és felnőtteknél, a tuberkulin tesztek kanyarban végzik;
- A bakteriológiai kultúra a Mycobacterium tuberculosis által okozott fertőzés vitathatatlan bizonyítéka. Megfelelő köpetgyűjtéssel a kórokozó kimutatása a gyomor mosásában, a tuberkulózis vizsgálata pozitívnak tekinthető. Koch pálcája megtalálható gennyes tályogokban, nyirokcsomókban, aszcitikus effúzióban, pleurális exudátumban, vizeletben, cerebrospinális folyadékban;
- A vörösvértestek üledési sebessége minden fertőzéssel - beleértve a tuberkulózist is - nő;
- A PCR lehetővé teszi egy specifikus kórokozó azonosítását, de a vizsgálat költséges;
- A Diaskintest meghatározza a pulmonális tuberkulózist, de gyakran negatív eredményt ad a fertőzés extrapulmonális lokalizációjában.
A tuberkulózis modern diagnosztikája egy komplex módszer alkalmazásával lehetővé teszi a testben található mycobacteriumok nagyfokú megbízhatósággal történő meghatározását. A meglévő módszerek segítségével aktív folyamat vagy fertőzés észlelhető. Csak időre van szükségünk, hogy kapcsolatba lépjünk a szakértőkkel!
A tuberkulózis PCR diagnózisa
A tuberkulózis egy specifikus fertőzés, amely évekig az emberi szövetekben fordulhat elő, majd több hónapig terjedhet. Ez egy krónikus betegség, amelynek optimális kezelési rendjeit nehéz kiválasztani. Ennek egyik oka a késői diagnózis, amikor a mikobaktériumok, míg az emberi testben már számos droghoz alkalmazkodtak.
Milyen modern diagnosztikai módszerek léteznek? PCR diagnosztika - mi ez? Hogyan történik ez a kutatás? Milyen esetekben diagnosztizálják ezt a módszert a tuberkulózis és mi a lényege?
Mi a PCR diagnosztika
Ez az egyik legmodernebb módszer nem csak a betegségek diagnosztizálására, hanem a biológiai anyagok kimutatására is. A PCR diagnosztikát viszonylag nemrégiben találták ki. Körülbelül 30 évvel ezelőtt 1983-ban egy amerikai biokémikus, Carey Banks Mullis, egy rövid szegmensben javasolt egy mikroorganizmusok biológiai anyagának komplex helyreállítási rendszerét. A tudós a felfedezésének köszönhetően a legmagasabb díjat kapott - a Nobel-díjat.
Mi az - a fertőzések PCR diagnózisa? A polimeráz láncreakció (PCR) a vírusos megbetegedések kimutatásának diagnózisa a géntechnológia módszerén alapul. Ezt széles körben használják az orvosi mikrobiológiában, az immunológiában és a virológiában. A módszer univerzális, és kis mennyiségű anyaggal segít diagnosztizálni. A fertőzés szó szerint előfordulhat a fertőzés első órájában, a betegség első tüneteinek megjelenése előtt.
A módszer abban áll, hogy az anyagból egy betegből nem a kórokozót, hanem a genom fragmenseit (DNS-részecskék), bioszintézisét és annak későbbi meghatározását határozzuk meg, melyik mikroorganizmus-osztályba tartozik a kapott genetikai anyag molekuláris genetikai módszerekkel.
Annak ellenére, hogy ez egy összetett folyamat, sokkal kevesebb időre van szükség, mint a fertőző ágensek kimutatására szolgáló számos biológiai módszer. Néhány órán belül a mikroorganizmus PCR-rel kimutatható. Ehhez nincs szükség arra, hogy elkülönítsük a környezetektől (vér, cerebrospinális folyadék, köpet), és hosszú ideig tenyésztjük mesterséges tápanyagokra. Elég, ha a fertőző ágens DNS-szálának egy kis fragmense van jelen a vizsgált anyagban.
A reakció alapja az a lehetőség, hogy mesterséges körülmények között (in vitro) a fertőző ágens nukleinsavmolekuláinak szintézisét hozzák létre.
Mi szükséges a PCR-hez?
- A primerek azok a DNS-szegmensek, amelyekből bioszintézis vagy létrehozás kezdődik.
- Nukleotidok vagy komplex vegyületek, amelyek egy DNS vagy RNS molekula alapját képezik.
- A polimeráz láncreakció polimeráz jelenléte nélkül lehetetlen, amely a PCR-t felgyorsító enzim.
A PCR-diagnosztika szakaszai
Hogyan történik a molekuláris diagnózis PCR-rel? Az eljárás egyszerű és rövid ideig tart, figyelembe véve az anyaggyűjtést.
- A vizsgálat megkezdése előtt meghozzák a szükséges biológiai anyagot - ez a hörgőmosó, a vér, a gyomor tartalma, a köpet. A biológiai anyag típusa a feltételezett kórokozótól függ.
- A két láncból álló DNS elsődleges szerkezetének denaturálása vagy megsemmisítése. Ennek a szakasznak a lényege, hogy a két áramkört a magas hőmérséklet hatására szétválasztjuk (a maximum 98 ºC, ami nem több, mint két perc).
- A PCR következő szakaszában, a hegesztésnek nevezve a hőmérsékletet több fokra csökkentjük, hogy a primer a DNS-szálhoz kötődjön.
- Nyúlás, amelynek során a kívánt molekulák szintézise közvetlenül történik.
Ennek eredményeként mindössze 25–30 ilyen ciklus kapja meg a mikroorganizmus DNS-nek megfelelő számú, könnyen felismerhető példányát.
Megköveteli-e a PCR tuberkulózis diagnosztizálását?
Nem lehetséges, hogy minden feltételezett tuberkulózisban szenvedő személy teljes mértékben PCR-t végezzen, mivel a módszerhez drága berendezések szükségesek. Nem minden nyilvános klinika engedheti meg magának, hogy megvásárolja. Emellett történt, hogy a legtöbb esetben a fertőzés diagnosztizálására szolgáló szokásos módszerek is igazolják magukat.
Ezek a következők:
- betegfelmérés, történelem felvétel;
- a személy teljes körű vizsgálata;
- a Mantoux tuberkulin tesztet használó vizsgálat;
- röntgen vagy fluorográfia;
- számítógépes diagnosztika, ha szükséges;
- mikrobiológiai kutatási módszerek: kenetmikroszkópia és köpetbakteriológiai vizsgálat.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-t speciális esetekben végezzük, amikor nehéz diagnózist készíteni, vagy nem lehetséges más műszeres módszerek végrehajtása.
A diagnosztikai módszerek bősége ellenére a tuberkulózis előfordulása tovább nő. Jelenleg nem csak a növekedés, hanem más jellemzők is vannak:
- a betegség gyakran súlyos formában fordul elő;
- a halálos esetek száma nő;
- A betegség diagnosztizált formái egyre inkább ellenállnak a modern kemoterápiának.
Az önmaguk vonakodása, hogy évente rutinszerű orvosi vizsgálatokat végezzenek, a vakcinálás elutasítása vezet a tuberkulózis terjedéséhez. Ilyen körülmények között gyors, informatív és hatékony kutatási módszerekre van szükségünk, amelyeknek a gyermekek és felnőttek számára hozzáférhetőnek kell lenniük. A fenti diagnosztikai módszerek mindegyike sokkal alacsonyabb, mint a PCR.
A tuberkulózis PCR-rel történő diagnosztizálásának előnyei
Ez a kutatás, bár új, jól bizonyult, különösen ellentmondásos esetekben, ahol több okból nem lehet diagnózist tenni.
A PCR-nek köszönhetően sokkal könnyebb kimutatni a tuberkulózis okozóját a vizsgált anyagban.
A PCR-diagnosztika előnyei a következők.
- Ez egy gyors elemzés. A DNS-molekula egy kis töredéke csak néhány óra (kb. Öt) óra alatt diagnosztizálható, amelyet sikeresen használnak vészhelyzetekben, amikor például egy művelet előtt meg kell határozni, hogy egy személy beteg-e tuberkulózisban.
- A PCR-analízis akkor engedélyezett, ha más módszerek nem állnak rendelkezésre vagy tilosak (a tüdő-tuberkulózis kimutatásához néha több röntgenfelvételt kell készíteni, ami nagy sugárzású dózis lesz).
- A PCR segítségével bármilyen biológiai környezetet vizsgálunk a kórokozó jelenlétében. Például tanulmányozhat cerebrospinális folyadékot, ha gyanúja van a tuberkuláris meningitisnek.
- A gyermekek fertőző betegségeinek engedélyezett PCR-diagnózisa, mivel a módszer biztonságos.
- Lehetővé teszi a kórokozó azonosítását a betegség bármely szakaszában.
- A PCR nagy érzékenysége lehetővé teszi a Mycobacterium tuberculosis kimutatását, még akkor is, ha a biológiai anyagban csak néhány mikroorganizmus van.
- Jó a betegség megismétlődésének diagnosztizálása.
Végül az olvasott PCR szinte tökéletes diagnosztikai módszernek tűnik, amely mindenkit a tuberkulózis gyanújává teszi. De vannak hátrányok is, ezeket figyelembe kell venni.
A PCR hiányosságai a tuberkulózis diagnózisában
Korunkban az ilyen diagnosztika ritkább, mint a szabályszerűség. És erre van ok.
- Ez egy drága kutatási módszer. Számos klinikánál a PCR-készülékek nagy költsége miatt hiányoznak, de a fizetett laboratóriumokban még mindig elvégezhető az elemzés.
- Közvetlenül a kezelés után a halott mycobacteriumok, vagy kis mennyiségben élő emberek még mindig jelen lehetnek az emberi szervezetben (az eredmény pozitív lesz a PCR-diagnosztika során), így a módszer ebben az időben nem lesz megbízható, nincs értelme elvégezni.
- A mikobaktériumok mutációi eredménytelen PCR-t eredményeznek - a normális DNS-szál szekvenciát nem lehet szintetizálni.
- Meg kell választani a megfelelő környezetet a vizsgálathoz, a vér csak akkor vehető igénybe, ha gyanítható, hogy fertőzött (szepszis), nincs szükség a köpetre, ha az idegrendszeri szervek tuberkulózisának kérdése van. Ebben az esetben a PCR nem lesz képes kimutatni a kórokozót, és a diagnózis informatív lesz.
A tuberkulózis PCR-analízissel történő kimutatására vonatkozó indikációk
A tuberkulózis PCR-diagnózisa leggyakrabban ellentmondásos esetekben történik. Mikor adják át az orvosok ezt a tanulmányt?
- Ha a szokásos rendelkezésre álló módszerek alapján nehéz diagnózist készíteni, de a tuberkulózisban szenvedő pácienssel érintkeztek.
- Abban az esetben, ha egy személyt nem lehet a klinikára átadni a rutinszerű tuberkulózisvizsgálatok elvégzésére, könnyebb megvizsgálni a PCR-t, mivel a vizsgálathoz tartozó köpet a korsóba szállítható, és a diagnózist néhány órán belül megerősítik.
- Ha egy személy sürgősségi műveletet hajt végre, és sürgősen kiderül, hogy beteg-e tuberkulózisban.
- Szükség esetén egy terhes nő is jobban vizsgálja a tuberkulózist PCR-sel, mivel a módszer biztonságos.
- Fizetett alapon bárki, akit nem diagnosztizáltak tuberkulózist, bakteriológiai módszerekkel és fluoroszkópiával igazolták. Ez akkor fordul elő, ha a tüdőben lévő sérülés nem érzékelhető a közvetlen képben, és a vizsgálat során a köpet átadásakor a személy nem tudta követni az anyagok helyes gyűjtésére vonatkozó ajánlásokat. Ebben az esetben a személy aggasztja a tüdő tuberkulózisra jellemző összes tünetet.
- Ha kétségek merülnek fel a Mantoux teszt eredményeivel kapcsolatban.
- Célszerű a gyermekek tuberkulózisának PCR-diagnózisa. Az eljárás biztonságos, nem hoz létre további sugárterhelést, és hatékonyan érzékeli a betegség diagnosztizálására nehezedő nehézségeket.
A tuberkulózis időben történő diagnosztizálása kulcsfontosságú a rendeltetésszerű kezeléshez és a betegség terjedésének csökkentéséhez. Gyakran előfordul, hogy az ismerős betegség-felismerési módszerek nem mindig hatékonyak. Ezért a PCR ma az egyik legmegbízhatóbb és legbiztonságosabb módja a fertőzés felismerésének a fejlődés korai szakaszában.
A tuberkulózis PCR-elemzése (diagnózis)
Tuberkulózis vagy fogyasztás - a 21. század egyik legnépszerűbb fertőző betegsége. Kórokozói különleges mikrobaktériumok - Koch botok.
A betegség nem csak a tüdőre terjed, hanem az agyra, az emésztésre, az ízületekre vagy a gerincre, a húgyúti rendszerre és a bőrre is.
A WHO szerint minden évben 10 millió ember szenved tuberkulózisban, ebből 3 millió halálos.
Különösen szomorú a helyzet a FÁK-országok területén, itt a tuberkuláris járványok rendszeresen jelentkeznek. Oroszországot, Kazahsztánt, Ukrajnát szomorú minősítés vezeti a fertőzés terjedéséről.
A fertőzést a légcseppek vagy az emésztőrendszer könnyen átviheti, a létfontosságú szerveket érinti, és képes gyorsan alkalmazkodni a polimer gyógyszerekhez és a kemoterápiához.
A tuberkulózis sikeres kezelésének egyik fő tényezője a fertőzés időben történő felismerése.
Diagnosztikai módszerek
Az emberiség számos módszert talált a veszélyes betegség felismerésére. A tuberkulózis diagnózisa műszeres és laboratóriumi.
Az első esetben a tuberkulózis, valamint a köpet, a vizelet vérvizsgálata.
A második csoport egy röntgen- és endoszkópiás vizsgálat. A tuberkulózis diagnosztizálására szolgáló instrumentális módszerek viszont sugárzás és sebészeti jellegűek.
A betegség megtalálására szolgáló sugárzás módszerei
- A fluorográfia olyan módszer, amely diagnosztizálja a CIS minden lakosának ismerős betegséget. Röntgensugárzással vizsgáljuk a tüdőt és a hilar nyirokcsomókat.
- Mellkas röntgen - hasonló a fluorográfiához, de jobb módszer a fertőzés kimutatására. A képet részletesebben és két előrejelzésben kapjuk meg, de ez az eljárás körülbelül hatszor drágább. Általában a betegség súlyos gyanúja után alkalmazzák.
- A számítógépes tomográfiát további diagnózisként végzik, amelyet a fertőzés jelenlétének jó oka is követ.
A diagnózis sebészeti módszerei közé tartoznak a hörgők endoszkópiája, valamint a mediastinoszkópia és a torakoszkópia.
Az első módszer a tüdő bronchiájának vizsgálata egy „szonda” segítségével ebben a szervben. A fennmaradó két módszer lehetővé teszi a tüdő pleurális részének vizsgálatát a mellkas szúrásával.
Mindhárom módszer súlyos műtéti beavatkozás, és a leggyakrabban a betegség progressziójának folyamatában használatos.
A laboratóriumi vizsgálatok a következők:
- A tubercle bacillus sputum analízise.
- Mikroszkópos vizsgálat.
- A tuberkulózis PCR diagnózisa
Mi a PCR diagnózis?
A fertőzések szakembereinek laboratóriumi diagnózisának egyik legfejlettebb módszere a polimeráz láncreakciót hívja.
Ezt a módszert a híres amerikai tudós, Carrie Mullis 1983-ban fejlesztette ki, amelyért nyerte el a Nobel-díjat.
A PCR-analízis a DNS-részecskék leválasztása a köpetből, vérből, cerebrospinális folyadékból, székletből stb. bioszintézisükre.
Egy komplex molekuláris genetikai vizsgálat segítségével meghatározzuk a páciens testében lévő mikrobák természetét.
Ez a fajta elemzés a tuberkulózisra több szakaszban történik:
- Először biológiai mintákat veszünk. Az anyagokat speciális tárolóedényekbe helyezik és a laboratóriumba küldik.
- A kutatóközpontban az elemzéseket 97 fokra melegítik. Ez lehetővé teszi, hogy elpusztítsuk a mikroorganizmusok DNS-jének genomját, amely több láncból áll.
- A hőmérsékletet specifikusan csökkentjük úgy, hogy a primerek (DNS-résztvevők, amelyekből a bioszintézis folyamat kezdődik) bármely dezoxiribonukleinsav-lánchoz kapcsolódhatnak.
- Ezután elvégezzük a detektáláshoz szükséges molekulák bioszintézisét.
A laboratóriumi kutatási folyamat 25–30 ismételt ciklusa után az orvosok felismerhetik, hogy a fertőző mikroorganizmusok jelen vannak-e a beteg testében.
Előnyök és hátrányok
A tuberkulózisra vonatkozó PCR a legmodernebb diagnosztikai technika. A módszer lehetővé teszi a fertőzés kimutatását bármely nagyfokú megbízhatósággal. előnyei:
- Sebesség - a vizsgálat legfeljebb öt órát vesz igénybe. A tuberkulózis mikrobák vizsgálatának eredményei 24 órán belül megtalálhatók.
- A biztonság - PCR módszer nem rendelkezik korhatárral.
- Időszerűség - ez a technika lehetővé teszi a tuberkulózis észlelését olyan szakaszokban, amikor a betegségnek nincsenek tünetei.
- Nagyfokú pontosság - ha az elemzésekben csak néhány mikroorganizmus van, akkor ezeket polimeráz láncreakcióval találjuk meg. Ez a technika lehetővé teszi a tuberkulózis okozójának egyszerű azonosítását is.
- Sokoldalúság - a diagnosztikát nem csak a fogyasztás észlelésére használják, hanem más betegségek, mint például a chlamydia, a gonorrhoea stb.
A számos előny ellenére ennek a technikának a hazai orvosi gyakorlatban való alkalmazása inkább kivétel, mint szabály. Ennek számos oka van.
A módszer hátrányai:
- A felmérés magas költsége.
- A módszer nem alkalmas azoknak, akik terápiás kezelésen esnek át, mivel a halott Koch baktériumok jelenléte hamis pozitív eredményhez vezethet.
- A fertőző mikroorganizmusok mutációja esetén nem lehet hamis következtetésekkel felismerni genomjukat.
- Fontos, hogy a megfelelő érzékelési környezetet válasszuk. Például a tuberkulózis PCR-hez végzett vérvizsgálat eredménye (hígítási bejegyzés) negatív lesz, ha az idegrendszer fertőzött.
- Nem mindig lehetséges ezt a módszert alkalmazni tüdőkárosodásban diagnosztizált betegekre.
Ezenkívül a tuberkulózis ilyen elemzéséhez olyan modern berendezésekre van szükség, amelyeket a kórházak 90 százaléka nem rendelkezik. A FÁK-ban az ilyen elemzést az Invitro klinikák hálózata végezheti el.
Az elemzési feltételek
Az ilyen típusú tuberkulózis-vizsgálatban részesülő betegekre vonatkozó ajánlások az átvizsgálás típusától függően eltérőek.
A PCR-hez való vérvétel során két órával kell tartani a dohányzást egy órával az eljárás előtt, hogy kizárja az alkoholt és a zsíros ételeket.
Azt is javasoljuk, hogy tartózkodjanak a fizikai terheléstől, lehetetlen a vér a tuberkulózisra egy üres gyomorban.
Amikor a szájból és az orrüregből tampont vesz, 2-4 órát nem lehet enni az eljárás előtt, különben nem lesz informatív. Ne is igyon alkoholt.
A pontos leolvasás megkezdése előtt tilos a dohányzás egy órával az eljárás előtt. Az előestéjén tartózkodjon a fogak fogmosásától és spray-től és a szájpermetektől.
Ha az urogenitális rendszer tuberkulózisát gyanítja, a beteg 2-3 nappal a szállítás előtt kizárja a szexet, 2-3 órával az eljárás előtt ne menjen a WC-be „kis úton”. A nemi szerveket speciális eszközök nélkül le kell mosni sima vízzel.
A nőket nem javasoljuk, hogy ne használjanak hüvelyi tablettákat, gyertyákat, golyókat, és ne tartsanak kritikus napokon.
5 nappal a szállítás előtt az eredmény szükséges a kolposzkópia, valamint a transzvaginális ultrahang kezeléséhez.
Mikor használják a PCR diagnosztikát?
Nem minden klinikán van ilyen komplex diagnózis, de az orvosok egyre inkább ilyen kutatási módszereket igényelnek. Általában ez a fajta elemzés speciális helyzetekben történik.
- A manta kétséges eredményei esetén a tuberkulózis vérvizsgálata alkalmazható.
- Abban az esetben, ha a beteg érintkezett egy fertőzött személyrel, de a kezelőorvos nem tudja pontosan meghatározni a diagnózist.
- Vészhelyzeti műtét esetén, ha rövid időn belül meg kell vizsgálni, hogy a betegnek van-e ilyen fertőzése.
- Ha a beteg terhes, amikor más kutatási módszerek nem elég biztonságosak egy újszülött számára.
Meg kell jegyezni, hogy ez a diagnózis a gyermekek biztonsága miatt ajánlott.
Ha egy hallgató ellenjavallt egy tuberkulin teszt ellen, a PCR segítségével vérmintát vehet a tuberkulózis helyett a köpeny helyett.
Mi a PCR-analízis a tuberkulózisra vonatkozóan
Innovatív módszer a mikroorganizmusok kimutatására, amelyet a tudós Cary Mullis talált ki a múlt század végén - PCR-elemzés. Írásaiért megkapta a Nobel-díjat. Teljes mértékben ezt a folyamatot nevezik polimeráz láncreakciónak. A mikroorganizmusok típusának helyreállítása a mellékelt biomateriában rövid DNS-fragmensekkel. Ez lehetővé teszi, hogy a fertőzést korai szakaszban észlelje, és azonnal kezdje el a kezelést anélkül, hogy súlyos tüneteket és szövődményeket okozna.
Mi az elemzés
A PCR által végzett diagnózis a biológiai anyagból származó patogén DNS-szegmensek beszerzése, és a megfelelő láncba való igazítása. Ez lehetővé teszi azon mikroorganizmus azonosítását, amelyhez a sejtek tartoznak.
Az eljárást három szakaszban hajtják végre:
- Biológiai anyagok gyűjtése.
- A DNS azonosítása és összehangolása.
- A fertőzés felismerése.
Ez a tanulmány speciális orvosi felszerelést igényel - erősítő. Fel van szerelve egy kamerával, ahol a vizsgált anyag kölcsönhatásba lép a magas hőmérséklet és a kémiai enzimekkel. A kijáratnál a laboratóriumi technikusnak van egy hosszú DNS-lánca a kórokozónak, ha van az emberi testben.
Hogyan kell felkészülni a diagnózisra?
A PCR-analízis egy komplex géntechnológiai folyamat, amely pontosságot és súlyosságot igényel mind a laboratóriumi technikusoktól, mind a betegektől. Az elemzési eredmények helyességében nagy szerepet játszik az eljárás előkészítése, azaz a megfelelő anyaggyűjtés.
A betegséggel kapcsolatos fő információforrások a következők:
Más opciók is használhatók, szükség esetén folyadékok kerülnek elemzésre különböző szervekből.
A beteg számára vannak olyan szabályok, amelyeket az eljárás előtt kell követni. Vérvizsgálat esetén 8 órával a gyűjtés előtt tilos:
- enni az ételt;
- füstölni;
- alkoholtartalmú italok itatása;
- vegye be a gyógyszert.
Este a köpet összegyűjtése előtt a gyógyszer részeg, hogy vékonyodjon és megkönnyítse az expektorációt. Reggel a szájüreg alapos higiéniája után gyűjtsük össze az anyagot.
A vizeletet egy steril edényben gyűjtjük, reggel, üres gyomorban, mosás után, mielőtt bármilyen gyógyszert szedne.
Ha egy személy antibiotikumot szed, akkor a polimeráz láncreakció elemzését el kell halasztani, különben a PCR eredménye nem megbízható. A sputumot vagy a vért két héttel a kezelés befejezése után kell adni.
Hogyan történik a baktériumok azonosításának folyamata
Röviden, az eljárás a DNS egy részének izolálása. A korszerű géntechnológiai módszerek alkalmazása lehetővé teszi a mikroorganizmusok típusának meghatározását. Továbbá az elemzéshez szükséges anyagnak kis mennyiségre van szüksége.
Technikailag ez egy nagyon bonyolult eljárás, de kevesebb időt vesz igénybe, mint a klasszikus bakteriológiai vizsgálatok. A kórokozóknak nem kell elkülönülniük a bioanyagból, nincs szükség arra, hogy több hétig növekedjen. A kézbesítés napján a beteg már tudja az elemzés eredményét.
A PCR teljes folyamata szakaszonként folytatódik:
- Folyamatban van a DNS elsődleges formája, amely magas hőmérsékleten, közel 100 fokkal két láncra oszlik.
- A hőmérséklet csökken, a szálak kapcsolódnak a nukleinsavfragmensekhez - a primerhez.
- Hosszabbítás történik - a molekuláris szerkezet szintézise.
A teljes munkamenet körülbelül harminc ilyen eljárásból áll, és egy ciklust ismétlünk láncreakcióként. Ez azért szükséges, hogy létrehozzuk azon sejtek számát, amelyekben a kapott baktériumok felismerhetővé válnak.
A tanulmány következtetése
A PCR (polimeráz-láncreakció) eredményének leírása ad egy TB-orvosnak, egyszerű vagy telepített. Az első esetben a leírás csak Koch-botok jelenlétéről vagy hiányáról tartalmaz információt. Ha a dekódolás részletes, a betegség terjedelmét, annak fókuszát kiderítheti. E kritériumok szerint minden esetben meg lehet határozni a tuberkulózis legmegfelelőbb kezelését.
A láncreakció polimeráz elemzése nem tesz különbséget az élő és a halott kórokozók között, és csak a jelenlétükről beszél. Ezért célszerű, ha a tuberkulózis második vizsgálatát csak 3-4 héttel az orvos által előírt terápia után végezzük el.
Ha az eredmény pozitív, akkor a „Mycobacterium tuberculosis” felirat kerül a következtetésre. Negatív eredmény esetén a baktériumok biológiai neve mellett "nincs észlelve" jel. Az elemzések hamis pozitívak lehetnek. Ez ritkán történik - a PCR-vizsgálatok végrehajtásának technikájának megsértése vagy nem életképes mikroorganizmusok jelenléte esetén. A végső következtetést a betegségről csak TB orvos végezheti.
A módszer előnyei
A tuberkulózis PCR diagnosztikája számos okból népszerűvé vált. Sok előnye van, többek között:
- A kutatás pontossága. A technológia elemzésekor a baktériumokat azonosítani lehet, még akkor is, ha kis mennyiségben vannak jelen.
- Gyors eredmény. Az egész folyamat az anyag összegyűjtéséig a befejezésig körülbelül 5 óra. A vetéshez képest több hétig kell várnia.
- Teljes biztonság a személy számára, ellentétben a fluorográfiával a sugárzással.
- Bármilyen folyékony biomateriát használnak. A pulmonalis tuberkulózisban a PCR megvalósításához a köpet adja a legpontosabb információt, a tuberkuláris meningitisben mintát veszünk a gerincvelőből. A vérvizsgálat segít azonosítani a helyi fertőzésfókuszokat.
- A baktériumok antibiotikumokkal szembeni érzékenységét tesztelik. Ez lehetővé teszi a helyes kezelés előírását.
- Korai diagnózis. Ismerje meg a betegség jelenlétét a tünetek megjelenése előtt.
A pozitív szempontok mellett hátrányok is vannak. A fő az ár. A PCR elemzése nem olcsó, ami a drága berendezések használatához kapcsolódik. Egy másik hátránya, hogy a tuberkulózis kezelését követő időszak után meg kell várni az újbóli vizsgálathoz szükséges időt. Néha a teszt eredménye hamis pozitív. Ez a bakteriális mutáció miatt következik be.
Ha PCR szükséges
A pulmonális tuberkulózisra vonatkozó PCR-nek nincs ellenjavallata, és teljesen biztonságos. Ezért vannak bizonyos helyzetek és betegségek, amikor ez az egyetlen lehetőség a kutatásra.
Ezek a következők:
- terhesség
- érintkezés egy tuberkulózisos pácienssel;
- a tüdőbetegségek diagnosztizálásának nehézségei;
- vizsgálat a műtét előtt;
- allergiás reakció;
- HIV-fertőzés;
- fiatal korban.
Használhatja a PCR módszerét a phtisiológia által kiadott irányban, valamint egy gyermekorvos, orvos vagy pulmonológus irányában.
Mi helyettesítheti a tuberkulózis PCR-diagnózisát
Más típusú felmérések nem elavultak, de továbbra is használatosak. Olyan esetekben alkalmazzák, amikor nem lehetséges a tuberkulózisra vonatkozó PCR végrehajtása. Ezenkívül a modern módszer nem ideális, néha a mutatóit megkérdőjelezik, és újra kell vizsgálni.
A következő módszerek segítenek meghatározni a tuberkulózis jelenlétét egy személyben:
- tuberkulin diagnózis (Mantoux);
- mellkas röntgen;
- biológiai anyagok flóra vizsgálatára;
- a tüdő röntgenfelvétele.
Ezek a tanulmányok ingyenesek és mindenki számára elérhetőek. De vannak hátrányaik:
- A tuberkulózis teszt allergiát okoz. A bőrbetegségek ellenjavallt.
- A röntgenvizsgálatokat sugárzás kíséri, amely nem alkalmazható gyermekek, immunhiányos és terhes nők esetében.
- A bakteriológiai vizsgálatok sokkal több időt vesz igénybe, az eredmény akár egy hónapra is vár.
Az alternatívák nem garantálják a száz százalékos helyes következtetést. A leggyakrabban megelőző célokra használják. A legmegbízhatóbb információkat a tuberkulózis PCR-ben történő diagnosztizálása adja. Ha lehetséges, jobb használni.
A gyermekek tuberkulózisának sajátosságai és a PCR szükségessége
A gyermeknek különösen védettnek kell lennie a betegségtől - a tuberkulózisfertőzés súlyos károsodást okozhat a szervezetnek, még nem teljesen kialakult immunitással.
Miután belépett Koch pálcájába a gyermek szervezetébe, a betegség fejlődése a következő lépéseken megy keresztül:
- Látens. Egy évig tart, anélkül, hogy bármilyen tünetet okozna.
- Mérgezés. Érinti az általános egészséget. Gyengeség, apátia, étvágytalanság, álmosság és csökkent teljesítmény. Állandóan enyhén magas hőmérséklet.
- A betegség elsődleges formája. A tuberkulózis lokalizált, a betegség középpontjába kerül. A gyermek köhögés, légszomj, fejfájás, duzzadt nyirokcsomók.
- Tuberkuláris bronchoadenitis. A tünetek a vállpántos fájdalom, a köhögés változó hangmagassággal, zihálás.
Általában a tuberkulint injekciózzák, hogy azonosítsák a fertőzést egy gyermek bőrén. Ha az ilyen típusú vizsgálat ellenjavallt, akkor a tuberkulózisra vonatkozó PCR a diagnózis elengedhetetlen lehetősége. A gyermekek általában vérvizsgálatot végeznek, de szükség esetén a köpet összegyűjtik. A tuberkulózis jelenlétének legkisebb gyanúja esetén további vizsgálatokat végeznek a pozitív eredmény biztosítása érdekében, és azonnal megkezdik a kezelés korai szakaszában, megelőzve a betegség kialakulását.
A modern kutatási módszerek mindig gyorsabbak és megbízhatóbbak. Kár, hogy az ilyen vizsgálatok elvégzéséhez szükséges drága berendezések miatt nem minden orvosi intézményben és településen lehet lehetőség. A vizsgálatot általában az orvos választja, de a betegnek joga van választani. Ha PCR tesztet kellett tennie, mondja el velünk a megjegyzésekben. Ha a cikk hasznos volt az Ön számára, ossza meg a közösségi hálózatokban - talán segíthet a barátaidnak.