A tuberkulózis olyan veszélyes betegség, amely sikeresen kezelhető időben történő diagnózissal.
A betegség korai szakaszában történő azonosítására szolgáló egyik leginformatívabb vizsgálatot PCR (polimeráz láncreakció) módszernek nevezik.
A PCR-analízis nem csak a leginkább informatív, hanem az egyik leginkább hozzáférhető tanulmány, amely a tuberkulózist a korai stádiumában érzékeli.
Mi a PCR-elemzés?
Valamennyi élő mikroorganizmus, beleértve a vírusokat és a baktériumokat, RNS és DNS molekulákat tartalmaz. Ezeknek a savaknak a kiemelésével nagy bizonyossággal elmondható, hogy az idegen anyagok jelen vannak az emberi vérben, és pontos diagnózist készítenek.
A PCR módszer lényege a biológiai folyadékok mintáinak speciális feldolgozása, aminek eredményeképpen meg lehet határozni, hogy melyik fajba tartoznak a benne lévő mikroorganizmusok.
A tuberkulózis PCR-jének elemzése: indikációk, előnyök és hátrányok
A PCR-technikát olyan esetekben használják, ahol súlyos tüdőelváltozások vannak ilyen esetekben, és légzőszervi megnyilvánulások (súlyos köhögés, hemoptysis), amikor a betegség klinikai tünetekkel nem lehet pontosan diagnosztizálni.
Javasolt a vizsgálat elvégzése és a betegség hordozójával való közvetlen érintkezés után. Az előnyei:
- a végrehajtás sebessége - az eredmény eléréséhez nem kell a kórokozó kultúráját termesztenie, vagy más összetett eljárásokat kell végrehajtania;
- rendkívül informatív - a tuberkulózis diagnosztizálásakor az elemzés pontossága 90% -ra és magasabbra emelkedik;
- nagy érzékenység és specifitás - a kórokozók azonosítására az anyagban csak egy sejt lehet a vírus;
- egyetemesség - gyakorlatilag bármilyen biológiai folyadék alkalmas analízisre: köpet, vér, hörgők.
Összehasonlításképpen: a csípőfoltok mikroszkópiájának pontossága, amelyet a tuberkulózis kimutatására használnak, mindössze 40-50%, alacsony kórokozók száma pedig 10% -ra vagy kevesebbre csökken. A sputum kultúra informatívabb, de az eredmények eléréséhez 2-8 hétig tart.
A Mantoux helyett tuberkulózis esetén PCR-t használhat, ha a személynek bármilyen ellenjavallata van a mintára.
A technika hátrányai közé tartozik a hamis negatív eredmény elérésének kockázata. Más szavakkal, a sputumban, a vérben vagy a vizeletben lévő specifikus DNS hiánya még nem jelzi a tuberkulózis hiányát a betegben.
Fontos. A gyermekek tuberkulózisának diagnosztizálásakor a PCR-analízis érzékenysége alacsonyabb, mint a felnőtteknél, és körülbelül 25-83%.
Fotó 1. A Mantoux helyett a PCR-t a gyermekre jó választás, ha allergiás vagy gyakran beteg.
A PCR elemzésének eljárása
A PCR-analízis lefolytatására szolgáló eljárást egy speciális eszköz, amelyet erősítőnek nevezünk, és négy szakaszból áll. A tanulmány olyan DNS-szakaszokat igényel, amelyek megkezdik a molekulák, nukleotidok (DNS-molekulák bázisai), valamint a polimeráz, vagy az eljárást felgyorsító enzim szintézisét.
- Biológiai anyaggyűjtés (köpet, vér, hörgőmosás).
- A mintát körülbelül 98% -ra melegítjük a DNS-lánc elsődleges szerkezetének elpusztítására.
- Hőmérséklet-csökkentés vagy a hőmérséklet néhány fokos csökkentése a primer DNS-szálhoz való kötődéséhez.
- Az eredmény előállításához szükséges molekulák szintézise.
25-30 ilyen ciklus elvégzése után a vírusok DNS-jének bizonyos számú példányát képezik, amelyekkel könnyen meghatározható a betegség okozója.
Figyelem: A PCR-analízis nem tesz különbséget a „halott” mikroorganizmusok és az „élő” között, ezért az eredmény a kezelés után bizonyos ideig pozitív lehet.
Előkészítés az elemzéshez
Ha PCR vérvizsgálatot végeznek a tuberkulózisra vonatkozóan, akkor nincs szükség speciális képzésre, de a betegeknek tanácsos az általános szabályokat betartani: tartózkodniuk legalább 8 órán át étkezéstől, megszüntetni az alkoholt és szedni a gyógyszert, nem szabad egy órát dohányozni az anyag bevétele előtt.
A köpet a fogmosás és a száj alapos öblítése után reggel gyűjtik.
Ha a váladék rosszul ürül ki, akkor egy éjjel-nappal kiürítőt kell venni, vagy belélegezni. A nyálkahártyával, köhögéssel, fehér vagy sárgás foltokkal diagnosztizált értéket mutat.
Ha nem lehetséges a köpet vizsgálata, a kórokozók azonosítására bronchio-tampont használnak. Egy ilyen elemzés nem igényel előkészítést, és az anyagot az alábbiak szerint végzik. A gége-fecskendő segítségével a pácienst a légcsőbe öntik, a kutatáshoz nátrium-klorid oldatot használunk, amely erős köhögést okoz.
Figyelmeztetés. Az elemzés eredményei torzítják az antibiotikumokat, a heparint és a helyi kezelésre használt egyéb gyógyszereket, így a vizsgálat 10-14 nappal az adagolás után ajánlott.
Mi a PCR a tuberkulózisra és a teszt elvégzésére?
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-t akkor írják elő, ha lehetetlen diagnózist készíteni, vagy más vizsgálatokat nem lehet elvégezni. Az elemzés lehetővé teszi, hogy a legkorábbi szakaszokban azonosítsuk a Koch pálcát, és időben elkezdjük a kezelést.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR leírása
A PCR-diagnosztika indikációi
A tuberkulózisra vonatkozó PCR típusai
Az elemzés előkészítése
Hogyan történik a tuberkulózisra vonatkozó PCR
A felmérés eredményeinek értelmezése
A gyermekek tuberkulózisára vonatkozó PCR sajátosságai
Mennyibe kerül a PCR a tuberkulózisra?
Megjegyzések és vélemények
A tuberkulózisra vonatkozó PCR leírása
A tuberkulózisra vonatkozó PCR (polimeráz láncreakció) egy pontos elemzés, amely néhány órán belül képes kimutatni a Koch pálcát. A diagnosztika a géntechnológiai módszereken alapul. Az orvosok izolálják a DNS-sejteket, a gén-molekuláris vizsgálatok segítségével a kórokozók típusának meghatározására.
A módszer előnyei
- lehetővé teszi a kórokozó azonosítását a korai stádiumban, látható tünetek megnyilvánulása nélkül;
- a diagnosztikának nincs ellenjavallata, és gyermekek számára megengedett;
- kutatást lehet végezni a minimális anyagmennyiség felvételével.
- a bioanyagok kutatásának egyetemessége;
- A vizsgálat hatékonyan meghatározza a betegség megismétlődését.
A módszer hátrányai
Az előnyök mellett a PCR-vizsgálatok is hátrányosak.
A főbbek a következők:
- A tanulmány nem mindenhol lehetséges. Mivel az ilyen diagnózis felszerelése költséges, fizetett laboratóriumokba telepítik.
- A tuberkulózisra vonatkozó PCR pozitív választ adhat, ha halott mikobaktériumokat észlel, például a kezelés után.
- A kórokozók mutációi jelentősen csökkentik a PCR módszer hatékonyságát, mivel a DNS szálak nem képesek szekvenciálisan szintetizálni.
- Annak szükségessége, hogy gondosan válasszuk ki a biológiai anyagokat elemzésre.
A PCR-diagnosztika indikációi
Küldje el a kérdőívre a következő jelzéseket:
- Ha legalább egy érintkezés van a tuberkulózisban szenvedő pácienssel, és a standard vizsgálattal nehéz azonosítani a betegséget.
- Vannak olyan helyzetek, amikor nem lehet személyt hozni röntgensugárzásra vagy más tanulmányokra. Ilyen esetekben sokkal könnyebb a köpet szállítani.
- Az elemzést az elkövetkező művelet előestéjén kell kijelölni, amikor meg kell határozni, hogy beteg-e vagy sem.
- Ha a betegnek kétséges eredménye a Mantoux reakció.
- Terhes nőknek és gyermekeknek rendeljék, hogy elkerüljék a röntgensugárzást.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR típusai
A tuberkulózis szűrésére szolgáló biomateriát külön kell megválasztani.
A tuberkulózis PCR diagnosztizálásához teszteket lehet végezni:
Vérvizsgálat
A tuberkulózis vérvizsgálatának jellemzői:
- Olyan esetekben, amikor más diagnosztika nem megfelelő vagy ellenjavallt. Például, hogy helyes diagnózist készítsen, több röntgenképet kell készítenie. A túlzott expozíció nem biztonságos a szervezet számára, így sokkal könnyebb a vér vétele a betegből.
- Továbbá az orvos irányíthat a vérre, amikor ellentmondásos eredményeket kap a fluorográfia után.
Nyál analízis
- A nyál analízise kevésbé népszerű és informatív, mint más vizsgálatok, mivel a tuberkulózis nem befolyásolja a nyálmirigyeket. Ezért a legtöbb esetben az eredmény negatív lesz.
- A módszer célja a tüdő- és extrapulmonális formák azonosítása.
- Ha a minta színe nem változik a reagens hatására, ez azt jelenti, hogy nincsenek kórokozók. Ha azonban egy betegség gyanúja merül fel, akkor további elemzési komplexet hajtanak végre.
Sputum elemzés
A sputum analízis a tuberkulózis patogének kimutatására a leginkább informatív. A mintákat többször veszik fel, általában háromszor elegendő. Ez kiküszöböli a rossz minőségű anyagok beszerzésének hibáit.
Ha egy személy tuberkulózissal fertőzött, a köhögés mellett kis mennyiségű köpet is felszabadul. A betegség előrehaladott stádiumában lévő betegeknél a nyálka véres foltokkal kerül kiválasztásra.
Nem ajánlott a köpet vizsgálatot végezni, ha a betegnek csontjainak vagy idegrendszerének gyanúja van.
Vizelet elemzés
A vizeletvizsgálat az egyik módja a betegség extrapulmonális formáinak kimutatásának: a vese-tuberkulózis és a húgyúti rendszer.
A betegség pulmonális formája esetén a vizelet általános elemzése gyakorlatilag nem informatív, mivel nem tapasztaltak kifejezett patológiai változásokat.
A videóból megtudhatja, hogy melyik orvos teszi a tuberkulózis diagnózisát. A csatorna tuberkulumból készült. ru.
Az elemzés előkészítése
A vérvizsgálat során a PCR-nek néhány szabályt kell követnie a megbízható eredmény elérése érdekében:
- Javasoljuk, hogy üres gyomorral elemezzék;
- kizárja az alkoholt a felmérés előestéjén;
- az antibiotikumokat az elemzés előtt 15-20 nappal be kell fejezni;
- Javasoljuk, hogy egy órával a vérvétel előtt tartózkodjon a dohányzástól.
Ha vizsgálatot végzünk, kövesse néhány szabályt is:
- az anyagot reggel gyűjtik, ezért előkészítik a fogaikat, és alaposan öblítik a szájüreget;
- ha a köpet nem mozog jól, ajánlott egy köpködést egy este venni vagy belélegezni;
- 15 nappal a vizsgálat előtt meg kell szüntetni az antibiotikumok szedését.
A vizeletvizsgálat megbízható eredményének elérése érdekében a betegnek ajánlott betartani a következő szabályokat:
- az anyagot reggel kell gyűjteni;
- előestéjén nem ajánlott olyan ételeket fogyasztani, amelyek megváltoztathatják a folyadék színét (cékla, áfonya és mások);
- Ne hagyja az antibiotikumokat a vizsgálat előtt 15 nappal.
Hogyan történik a tuberkulózisra vonatkozó PCR
Az anyagbevitel jellemzői:
- A laboratóriumban egy vénából vérvizsgálatot készítenek reggelente.
- A nyálkahártya kóros elszállításához szükség van a gégénre, és előnyösen nagy mennyiségű nyál nélkül. A betegnek egy speciális steril tartályba kell köpnie, majd át kell adnia a vizsgálatot.
- Az orvosok egy szerszámmal kaparnak egy kaparót az arclap nyálkahártyájáról.
- A vizeletet egy speciális tartályban béreljük. Vegyük a reggeli rész középső részét.
A PCR-rel történő molekuláris genetikai reakciót egy speciális eszköz, amelyet erősítőnek nevezünk. A molekulák szintézisét megkezdő DNS-szegmensek tanulmányozása.
A technika négy szakaszból áll:
- Kezdetben a szükséges biológiai anyagot gyűjtik a kutatáshoz (vér, köpet és nyál).
- Ezután a mintát legfeljebb 98 ° C hőmérsékleten, legfeljebb két percig melegítjük. Így a DNS-genetika elsődleges formája megsemmisül, és két lánc keletkezik.
- Ezután jön a hőkezelés vagy a hőmérséklet csökkentése, aminek következtében a primer a DNS-szálhoz kötődik.
- Az utolsó szakaszt meghosszabbításnak nevezik. Ez a molekulák szintézise, ami a végeredményhez vezet.
25-30 ilyen ciklust kell költenie a vírusok DNS-jének bizonyos számú példányának megszerzéséhez. A betegség okozóit azok határozzák meg.
A PCR-diagnosztika információtartalma és megbízhatósága 100%.
A felmérés eredményeinek értelmezése
Az elemzés ideje 5–6 óra.
A PCR módszerrel végzett diagnosztika 2 eredményváltozatot ad:
- Found. A vizsgált anyagban kimutatták a tuberkulózus szer DNS-jét. A fertőzés valószínűsége 97%. Az ilyen betegeket gyorsan eljuttatják egy TB-orvoshoz, ahol a kezelést végzik.
- Nem található. A negatív válasz a kórokozó hiányát jelzi.
Ha az eredmény pozitív, az orvos részletes dekódolást végez, amely meghatározza a betegség színpadát és fókuszát.
Fotógaléria
A gyermekek tuberkulózisára vonatkozó PCR sajátosságai
A PCR-t akkor írják elő, ha a Mantoux teszt eredménye bizonytalan vagy a legkisebb fertőzés gyanúja. Az eljárás biztosítása a gyermekek számára biztonságos.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-eredmények értelmezése
- Mi a PCR diagnosztika
- Felelősség a tesztek átadása előtt
- Gyűjtési folyamat
- Az eredmények megfejtése
Nemrégiben a tuberkulózisra vonatkozó PCR a legpontosabb elemzés, bár más módszerek is léteznek. Ez a betegség egyre lendületesebb, így a szakértők megpróbálnak új technológiákat feltalálni a Koch botok azonosítására a szervezetben. Mindenki tudja, hogy a tuberkulózis olyan fertőző betegség, amely mind a légcseppek, mind a rovarok által továbbítható. ezért elengedhetetlen az időszakos felmérések elvégzése.
Mi a PCR diagnosztika
A polimeráz láncreakció (PCR) csak néhány órát tesz lehetővé a fertőző ágens kimutatására, és 1-2 molekulát is azonosíthat egy hatalmas szám között. Ennek a tesztnek számos előnye van, amelyek a következőkben nyilvánulnak meg:
- 100% -os detektálást, mint egy biológiai mintában, 10-100 sejtből határozzuk meg;
- az MBT DNS specifitása nagyon magas;
- a sebességelemzés 4-4,5 óra;
- a tüdő-tuberkulózis diagnosztizálása, amely más módszerek esetében szinte irreális;
- egy bizonyos fragmenst feltárunk, amely csak egy specifikus patogénben van jelen.
Ezzel a diagnózissal nem csak a fertőzés időben történő felismerése, hanem egy személy elkülönítése és megfelelő kezelése is lehetséges. Ez különösen igaz a tuberkulózisra, mert a Koch-botok pontos elhelyezkedését nehéz azonosítani. Ezen túlmenően ez az elemzés képes vizsgálni a mikobaktériumok egy adott gyógyszerrel szembeni rezisztenciáját, ezáltal meghatározva a kezelés módját. A polimeráz láncreakció ellenállása érdekében használjon olyan géneket, amelyek bizonyos gyógyszerek immunitását megtartják, majd két nappal később kaphat eredményt. Ez jótékony hatással van a betegség megelőzésére.
Felelősség a tesztek átadása előtt
Meg kell jegyezni, hogy a PCR nemcsak a tubercle bacillus kórokozóit, hanem sok más betegséget és még HIV-t is észlel. Az elemzést bármely biológiai folyadékkal végezzük. Ezek lehetnek:
- vér;
- vizelet;
- cal;
- nemi szekréciók;
- váladék;
- gerincfolyadék;
- kaparás minden szervből.
Az összegyűjtött anyagot egy speciális erősítőbe, azaz egy olyan reaktorba helyezzük, ahol néhány enzim található, aminek köszönhetően láncreakció történik a DNS-fertőzés dupla megdöntésére. Ezt követően dekódolás történik. Az eredmény általában pozitív vagy negatív.
A tuberkulózis diagnózisát olyan esetekben írják elő, ahol először is a betegség súlyos tünetei vannak, másodszor, a személy nagyon hosszú időn át akut légzőszervi betegségekben szenved, és harmadszor, az emberek érintkezésbe kerülnek a tuberkulózisban szenvedő betegekkel. De az orvos elvégezheti ezt az elemzést és a röntgenvizsgálat után megkérdőjelezhető képek jelenlétében.
A polimeráz láncreakciót a pulmonológus, a TB-szakember, a terapeuta és a gyermekorvos szakemberei irányíthatják. Természetesen vannak olyan szabályok, amelyeket a betegnek követnie kell, mielőtt adományozna, például vér a tuberkulózisra. Először is, 4-5 órával nem lehet étkezni a szállítás előtt, és ezt megelőző napon ki kell zárnia a táplálkozásból származó zsíros és allergén ételeket. Célszerű továbbá, hogy ne használjanak antibiotikumokat és személyes higiéniai termékeket gél formájában.
Gyűjtési folyamat
De nem csak a beteg köteles betartani a szükséges feltételeket. Ugyanez vonatkozik az orvosokra is. Ahhoz, hogy a tuberkulózis vizsgálatokat helyesen lehessen végezni, csak steril körülmények között kell elvégezni, különben más mikroorganizmusok juthatnak a folyékony közegbe, ezért az értelmezés helytelen lesz. Minden műszernek, műszernek és tartálynak is sterilnek kell lennie.
Így az anyagot speciális tárolóedényekbe gyűjtik, amelyek szükség esetén a szakember a pácienst adják. Például a vizeletet csak az első után gyűjti össze, amikor egy személy reggel felébred. De szükség van a reggeli vízkezelésre a megfelelő helyeken. A vizelet elegendő mennyisége 20-30 ml. De a gerincvelőből származó szinoviális folyadék és más összetett elemzések csak egy magasan képzett szakembert vesznek igénybe, a helyhez kötött körülmények között.
Az emberiség felében csak egy nőgyógyász veszi a tampont egy speciális székre, és férfiaknál a húgycsőből (kívülről) kaparó vagy tampont veszünk. A garatból kenet vesz egy speciális spatulával vagy más szerszámmal. Vért veszünk közvetlenül a vénából steril fecskendőkkel.
A gyűjtés utolsó szakaszában az orvos, figyelembe véve a szállítás és tárolás valamennyi követelményét, továbbküldi a mintát egy speciális laboratóriumba további vizsgálat céljából. Ehhez a laboratóriumi személyzet vér- vagy egyéb kenetet helyez el egy kémcsőbe, amelyben egy olyan anyagot adnak hozzá, amely megelőzi a minta korai öregedését.
A vér esetében, ami különösen fontos, ez az anyag nem teszi lehetővé a vérrögképződést, ezért a vérrögök jelenléte kizárt. A csöveket nem rázzuk össze, mivel lehetséges a vörösvértestek állapotának károsodása. Mindez azért szükséges, hogy könnyebb és gyorsabb legyen a vér összes összetevőjének azonosítása.
Ezután a tuberkulózis vérét centrifugáljuk, ami elválasztja a sejtsejtet a plazmától, amelyet mikroszkóp alatt vizsgálunk. A kezdeti adatok vizsgálata után adjunk hozzá az enzimet (transzkriptáz), és bizonyos hőmérsékleti üzemmódban végezzük el a következő láncreakciót. Ennek következtében a genetikai anyag töredékei képződnek, amelyek dekódolásnak vannak kitéve.
Az eredmények megfejtése
Az elemzés nem mindig igaz. A hamis pozitív eredmények csak akkor következnek be, ha a stroke előkészítésének és benyújtásának minden követelménye nem teljesül. Ezért mind a betegnek, mind az orvosoknak szigorúan be kell tartaniuk a fent említett szabályokat.
A dekódolás egyszerre és összetett lehet. Az első a „negatív” vagy „pozitív” meghatározása, ami arra utal, hogy negatív dekódolással a betegnek nem kell aggódnia, mert nincsenek fertőzések.
Egy egyszerű forma pozitív eredményei szerint a kórokozók száma elhanyagolható. Az a tény, hogy az orvostudományban vannak bizonyos normák, amelyeknek köszönhetően meghatározható a betegségekkel szembeni rezisztencia mértéke.
A teszt komplex dekódolásában azonban bizonyos mikroorganizmusok specifikus tartalma határozza meg, amely lehetővé teszi a legpontosabb következtetések levonását. Természetesen egyetlen beteg sem képes önállóan megfejteni ezeket az adatokat, és az orvos részletesen elmagyarázhatja a pácienst.
Ezek a számok azt mutatják, hogy hol találhatók a fókuszok, milyen szakaszban vannak, és mi okozza a betegség előfordulását.
A dekódolás alapján a szakértők előírják a kezelés módját, stb. Soha ne felejtsük el, hogy a kórokozók legkisebb jelenléte jelzi a szervezetben való jelenlétüket. Ezért előbb-utóbb a fertőzés tovább terjedhet, és a tuberkulózis fokozódik. Ne légy felelőtlen a saját egészségére, mindig kövesse a szakértők ajánlásait.
A tuberkulózis PCR diagnózisa
A tuberkulózis egy specifikus fertőzés, amely évekig az emberi szövetekben fordulhat elő, majd több hónapig terjedhet. Ez egy krónikus betegség, amelynek optimális kezelési rendjeit nehéz kiválasztani. Ennek egyik oka a késői diagnózis, amikor a mikobaktériumok, míg az emberi testben már számos droghoz alkalmazkodtak.
Milyen modern diagnosztikai módszerek léteznek? PCR diagnosztika - mi ez? Hogyan történik ez a kutatás? Milyen esetekben diagnosztizálják ezt a módszert a tuberkulózis és mi a lényege?
Mi a PCR diagnosztika
Ez az egyik legmodernebb módszer nem csak a betegségek diagnosztizálására, hanem a biológiai anyagok kimutatására is. A PCR diagnosztikát viszonylag nemrégiben találták ki. Körülbelül 30 évvel ezelőtt 1983-ban egy amerikai biokémikus, Carey Banks Mullis, egy rövid szegmensben javasolt egy mikroorganizmusok biológiai anyagának komplex helyreállítási rendszerét. A tudós a felfedezésének köszönhetően a legmagasabb díjat kapott - a Nobel-díjat.
Mi az - a fertőzések PCR diagnózisa? A polimeráz láncreakció (PCR) a vírusos megbetegedések kimutatásának diagnózisa a géntechnológia módszerén alapul. Ezt széles körben használják az orvosi mikrobiológiában, az immunológiában és a virológiában. A módszer univerzális, és kis mennyiségű anyaggal segít diagnosztizálni. A fertőzés szó szerint előfordulhat a fertőzés első órájában, a betegség első tüneteinek megjelenése előtt.
A módszer abban áll, hogy az anyagból egy betegből nem a kórokozót, hanem a genom fragmenseit (DNS-részecskék), bioszintézisét és annak későbbi meghatározását határozzuk meg, melyik mikroorganizmus-osztályba tartozik a kapott genetikai anyag molekuláris genetikai módszerekkel.
Annak ellenére, hogy ez egy összetett folyamat, sokkal kevesebb időre van szükség, mint a fertőző ágensek kimutatására szolgáló számos biológiai módszer. Néhány órán belül a mikroorganizmus PCR-rel kimutatható. Ehhez nincs szükség arra, hogy elkülönítsük a környezetektől (vér, cerebrospinális folyadék, köpet), és hosszú ideig tenyésztjük mesterséges tápanyagokra. Elég, ha a fertőző ágens DNS-szálának egy kis fragmense van jelen a vizsgált anyagban.
A reakció alapja az a lehetőség, hogy mesterséges körülmények között (in vitro) a fertőző ágens nukleinsavmolekuláinak szintézisét hozzák létre.
Mi szükséges a PCR-hez?
- A primerek azok a DNS-szegmensek, amelyekből bioszintézis vagy létrehozás kezdődik.
- Nukleotidok vagy komplex vegyületek, amelyek egy DNS vagy RNS molekula alapját képezik.
- A polimeráz láncreakció polimeráz jelenléte nélkül lehetetlen, amely a PCR-t felgyorsító enzim.
A PCR-diagnosztika szakaszai
Hogyan történik a molekuláris diagnózis PCR-rel? Az eljárás egyszerű és rövid ideig tart, figyelembe véve az anyaggyűjtést.
- A vizsgálat megkezdése előtt meghozzák a szükséges biológiai anyagot - ez a hörgőmosó, a vér, a gyomor tartalma, a köpet. A biológiai anyag típusa a feltételezett kórokozótól függ.
- A két láncból álló DNS elsődleges szerkezetének denaturálása vagy megsemmisítése. Ennek a szakasznak a lényege, hogy a két áramkört a magas hőmérséklet hatására szétválasztjuk (a maximum 98 ºC, ami nem több, mint két perc).
- A PCR következő szakaszában, a hegesztésnek nevezve a hőmérsékletet több fokra csökkentjük, hogy a primer a DNS-szálhoz kötődjön.
- Nyúlás, amelynek során a kívánt molekulák szintézise közvetlenül történik.
Ennek eredményeként mindössze 25–30 ilyen ciklus kapja meg a mikroorganizmus DNS-nek megfelelő számú, könnyen felismerhető példányát.
Megköveteli-e a PCR tuberkulózis diagnosztizálását?
Nem lehetséges, hogy minden feltételezett tuberkulózisban szenvedő személy teljes mértékben PCR-t végezzen, mivel a módszerhez drága berendezések szükségesek. Nem minden nyilvános klinika engedheti meg magának, hogy megvásárolja. Emellett történt, hogy a legtöbb esetben a fertőzés diagnosztizálására szolgáló szokásos módszerek is igazolják magukat.
Ezek a következők:
- betegfelmérés, történelem felvétel;
- a személy teljes körű vizsgálata;
- a Mantoux tuberkulin tesztet használó vizsgálat;
- röntgen vagy fluorográfia;
- számítógépes diagnosztika, ha szükséges;
- mikrobiológiai kutatási módszerek: kenetmikroszkópia és köpetbakteriológiai vizsgálat.
A tuberkulózisra vonatkozó PCR-t speciális esetekben végezzük, amikor nehéz diagnózist készíteni, vagy nem lehetséges más műszeres módszerek végrehajtása.
A diagnosztikai módszerek bősége ellenére a tuberkulózis előfordulása tovább nő. Jelenleg nem csak a növekedés, hanem más jellemzők is vannak:
- a betegség gyakran súlyos formában fordul elő;
- a halálos esetek száma nő;
- A betegség diagnosztizált formái egyre inkább ellenállnak a modern kemoterápiának.
Az önmaguk vonakodása, hogy évente rutinszerű orvosi vizsgálatokat végezzenek, a vakcinálás elutasítása vezet a tuberkulózis terjedéséhez. Ilyen körülmények között gyors, informatív és hatékony kutatási módszerekre van szükségünk, amelyeknek a gyermekek és felnőttek számára hozzáférhetőnek kell lenniük. A fenti diagnosztikai módszerek mindegyike sokkal alacsonyabb, mint a PCR.
A tuberkulózis PCR-rel történő diagnosztizálásának előnyei
Ez a kutatás, bár új, jól bizonyult, különösen ellentmondásos esetekben, ahol több okból nem lehet diagnózist tenni.
A PCR-nek köszönhetően sokkal könnyebb kimutatni a tuberkulózis okozóját a vizsgált anyagban.
A PCR-diagnosztika előnyei a következők.
- Ez egy gyors elemzés. A DNS-molekula egy kis töredéke csak néhány óra (kb. Öt) óra alatt diagnosztizálható, amelyet sikeresen használnak vészhelyzetekben, amikor például egy művelet előtt meg kell határozni, hogy egy személy beteg-e tuberkulózisban.
- A PCR-analízis akkor engedélyezett, ha más módszerek nem állnak rendelkezésre vagy tilosak (a tüdő-tuberkulózis kimutatásához néha több röntgenfelvételt kell készíteni, ami nagy sugárzású dózis lesz).
- A PCR segítségével bármilyen biológiai környezetet vizsgálunk a kórokozó jelenlétében. Például tanulmányozhat cerebrospinális folyadékot, ha gyanúja van a tuberkuláris meningitisnek.
- A gyermekek fertőző betegségeinek engedélyezett PCR-diagnózisa, mivel a módszer biztonságos.
- Lehetővé teszi a kórokozó azonosítását a betegség bármely szakaszában.
- A PCR nagy érzékenysége lehetővé teszi a Mycobacterium tuberculosis kimutatását, még akkor is, ha a biológiai anyagban csak néhány mikroorganizmus van.
- Jó a betegség megismétlődésének diagnosztizálása.
Végül az olvasott PCR szinte tökéletes diagnosztikai módszernek tűnik, amely mindenkit a tuberkulózis gyanújává teszi. De vannak hátrányok is, ezeket figyelembe kell venni.
A PCR hiányosságai a tuberkulózis diagnózisában
Korunkban az ilyen diagnosztika ritkább, mint a szabályszerűség. És erre van ok.
- Ez egy drága kutatási módszer. Számos klinikánál a PCR-készülékek nagy költsége miatt hiányoznak, de a fizetett laboratóriumokban még mindig elvégezhető az elemzés.
- Közvetlenül a kezelés után a halott mycobacteriumok, vagy kis mennyiségben élő emberek még mindig jelen lehetnek az emberi szervezetben (az eredmény pozitív lesz a PCR-diagnosztika során), így a módszer ebben az időben nem lesz megbízható, nincs értelme elvégezni.
- A mikobaktériumok mutációi eredménytelen PCR-t eredményeznek - a normális DNS-szál szekvenciát nem lehet szintetizálni.
- Meg kell választani a megfelelő környezetet a vizsgálathoz, a vér csak akkor vehető igénybe, ha gyanítható, hogy fertőzött (szepszis), nincs szükség a köpetre, ha az idegrendszeri szervek tuberkulózisának kérdése van. Ebben az esetben a PCR nem lesz képes kimutatni a kórokozót, és a diagnózis informatív lesz.
A tuberkulózis PCR-analízissel történő kimutatására vonatkozó indikációk
A tuberkulózis PCR-diagnózisa leggyakrabban ellentmondásos esetekben történik. Mikor adják át az orvosok ezt a tanulmányt?
- Ha a szokásos rendelkezésre álló módszerek alapján nehéz diagnózist készíteni, de a tuberkulózisban szenvedő pácienssel érintkeztek.
- Abban az esetben, ha egy személyt nem lehet a klinikára átadni a rutinszerű tuberkulózisvizsgálatok elvégzésére, könnyebb megvizsgálni a PCR-t, mivel a vizsgálathoz tartozó köpet a korsóba szállítható, és a diagnózist néhány órán belül megerősítik.
- Ha egy személy sürgősségi műveletet hajt végre, és sürgősen kiderül, hogy beteg-e tuberkulózisban.
- Szükség esetén egy terhes nő is jobban vizsgálja a tuberkulózist PCR-sel, mivel a módszer biztonságos.
- Fizetett alapon bárki, akit nem diagnosztizáltak tuberkulózist, bakteriológiai módszerekkel és fluoroszkópiával igazolták. Ez akkor fordul elő, ha a tüdőben lévő sérülés nem érzékelhető a közvetlen képben, és a vizsgálat során a köpet átadásakor a személy nem tudta követni az anyagok helyes gyűjtésére vonatkozó ajánlásokat. Ebben az esetben a személy aggasztja a tüdő tuberkulózisra jellemző összes tünetet.
- Ha kétségek merülnek fel a Mantoux teszt eredményeivel kapcsolatban.
- Célszerű a gyermekek tuberkulózisának PCR-diagnózisa. Az eljárás biztonságos, nem hoz létre további sugárterhelést, és hatékonyan érzékeli a betegség diagnosztizálására nehezedő nehézségeket.
A tuberkulózis időben történő diagnosztizálása kulcsfontosságú a rendeltetésszerű kezeléshez és a betegség terjedésének csökkentéséhez. Gyakran előfordul, hogy az ismerős betegség-felismerési módszerek nem mindig hatékonyak. Ezért a PCR ma az egyik legmegbízhatóbb és legbiztonságosabb módja a fertőzés felismerésének a fejlődés korai szakaszában.
A tuberkulózis PCR diagnózisa gyermekek és felnőttek esetében
A modern diagnosztikai módszerek (pcr, diaskintest, quantiferon teszt) nagyon hatékonyak, de a gyakorlatban a vizsgálatokat nem igazolták. A fertőzött és beteg emberek azonosításának alapja a tuberkulin-diagnózis.
A módszer lehetővé tette számos beteg azonosítását, a morbiditás, a mortalitás statisztikáinak csökkentését.
A mikobaktériumok és a köpetmikroszkópia Zill-Nelson szerint történő vetésével lehetővé válik a fertőzés megbízható diagnosztizálása. A probléma a sputum pontos bevételét okozza közvetlenül az érintett bronchusból. A tuberkuláris folyamat hátterében a hörgőfa jelentős része érintett. A bakteriális vetés után lehetőség van a kórokozó antibiotikumra való érzékenységének vizsgálatára.
A diagnózis eredményeinek phtisiatrológusok által történő elemzése után világossá vált, hogy a Koch botjainak kiválasztásának hiánya nem jelenti a fertőzés hiányát a szervezetben. A kórokozót a második, a harmadik, a negyedik bevételi anyag után lehet meghatározni.
A modern diagnosztikai módszerek (dst, Quantiferon teszt) a betegség aktív lefolyásával észlelik a mikobaktériumokat. A nyirokcsomók belsejében lévő mikobaktériumok jelenlétében, a betegség extrapulmonális formáival, a tesztek leggyakrabban negatívak.
Az időszerű diagnózis az alapja a betegség súlyos szövődményeinek és veszélyes következményeinek megelőzésére.
Modern módszerek
A klasszikus tuberkulin diagnózis helyettesítése diaskintest (dst). A legfrissebb előírások szerint a tanulmány helyettesíti a standard Mantoux tesztet, amely lehetővé tette, hogy a lakosság körében számos morbiditási és fertőzési esetet azonosítsanak.
A Diaskintest lényege, valamint a tuberkulin diagnózis magában foglalja a tuberkulózis kórokozóinak fehérjeinek szubkután beadását. Az injekcióra adott válaszként kialakult a túlérzékenységi reakció specifikus bőrváltozásokkal: vörösség, induráció, hólyagosodás.
A Diaskintest pozitív eredménye jellemző a betegség aktív lefolyása esetén. Fertőzés vagy fokozott allergia esetén a vizsgálat negatív lesz. A dst negatív hatása erős immunitás eredménye, de ha egy személy fertőzött.
A Mantu-hoz képest a Diaskintest a tuberkulózis diagnosztizálásának sokoldalúbb és érzékenyebb módja. A fertőzés kimutatásának hiánya a tuberkulin-diagnózissal egyidejűleg történő alkalmazását igényli.
A klinikai vizsgálatok eredményei ellenére a tudósok a módszer általános egyetemességéről és érzékenységéről vitatkoznak, a tanulmány nem tekinthető egyetemes diagnosztikai megoldásnak.
A vizsgálatot Sechenov Kutatóintézet akadémikusai fejlesztették ki. Az allergiák hiányát a diaskintest alkalmazásakor a fajspecifikus tuberkulózisfehérjék szubkután beadása magyarázza. Bevezetésüket a bőrpír, bőrpír, pecsétek alakulása határozza meg.
Mi a quantiferon teszt
A quantiferon tesztet a beteg vérének bevétele után értékeljük. Az eljárás mechanizmusa az, hogy meghatározzuk a gamma-interferont, amelyet a T-limfociták felszabadítanak a mikobaktérium-tuberkulózissal való találkozás után. A tesztek meghatározzák a nemcsak emberi és szarvasmarha-baktériumokat tartalmazó tuberkuláris fehérjéket. A quantiferon tesztet más mikobaktériumok által okozott mikobakteriózisok diagnosztizálására is használhatjuk, amelyek specifikus változásokat képeznek a röntgenfelvételen. A vizsgálati eredményt több kémcsőben határozzuk meg, ami növeli az eljárás diagnosztikai érzékenységét.
PCR a gyermekkori tuberkulózis diagnosztizálására
A polimeráz láncreakció pontos, de költséges módszer a tuberkulózis diagnosztizálására. A PCR-t bronchoszkópia után végezzük.
A negatív eredmények megszerzése után racionális a polimeráz láncreakció végrehajtása. Az eredményeket a Mycobacterium tuberculosis háromszoros köpetes tenyésztése után értékeltük. A legkedvezőbb körülmények között a kórokozó azonosítása fertőzést jelez. A kemoprofilaxis célja, hogy Koch botok jelenlétében elkerülje az aktív tuberkulózis folyamatát.
Mikroorganizmus törzsének beérkezése után lehetséges az antibiotikum-érzékenység beültetése. A mikroorganizmusokat elpusztító antibiotikumok meghatározása lehetővé teszi számunkra, hogy értékeljük a fertőzés kezelésére szolgáló gyógyszereket.
A gyermekek PCR-jét a vetés negatív eredményeivel végezzük, de ha van a tuberkulin-vizsgálat fordulata, a fertőzés röntgen jeleinek vizualizálása, az aktuális fertőzés klinikai tüneteinek kimutatása.
A polimeráz láncreakció nagy pontosságot biztosít (kb. 99%). Az eljárás nukleinsav-amplifikáción alapul. A mikobaktériumok, vírusok és más mikroorganizmusok egyedi nukleotidszekvenciákkal rendelkeznek. A diagnózisuk lehetővé teszi a betegség okozójának azonosítását.
A PCR érzékenysége a gyermekeknél alacsonyabb, mint a felnőtteknél. A gyakorlatban a gyermek polimeráz láncreakciójának alábbi jellemzőit tártuk fel:
- Specifitás - 80-100%;
- Érzékenység - 25-80%.
A módszer nagy pontossága ellenére a negatív eredmény megszerzése nem jelenti a tuberkulózis hiányát a gyermekeknél. A módszer racionálisabb alkalmazása immunhiányos betegeknél. Az extrapulmonális tuberkulózis fertőzés diagnózisában.
A tolmácsolási hibákat a tanulmányi anyagok gyűjtésének és elkészítésének megsértése határozza meg.
A PCR negatív eredményének okai a tuberkulózis diagnózisában
A mikobaktériumok elterjedése a szervezetben limfogén (nyirokereken keresztül) és hematogén (a véráramláson keresztül) biztosítja a sok szövet gyarmatosítását, az extrapulmonális fertőzésfókusz megjelenését.
A tüdőben lévő pusztítás (pusztítás) fókuszainak röntgensugaras meghatározásakor nincs szükség PCR-re. A röntgenfelvételt használó felnőtteknél nagyfokú bizalommal lehet azonosítani a fejlett formákat.
Gyermekeknél a PCR-vizsgálatot gyakrabban használják a nyirokcsomók belsejében található mycobacteriumok látens lokalizációja miatt, ami más diagnosztikai módszerek alkalmazása esetén negatív eredményekhez vezet. A bakteriális tenyészetben elegendő körülbelül 10 mikroorganizmus kimutatása. Ne feledje, hogy nem mindenki felelős az aktív pulmonalis tuberkulózisért.
A PCR, a bakteriális vetés helyes diagnosztizálásához a DST-t követni kell:
- Az anyagot steril csövekben tárolja;
- Távolítsuk el más baktériumok bejutását;
- Szállítás közben tartsa be a személyes higiéniát, hogy megakadályozza, hogy a bioanyag a testre, az arcra és a légutakra esik.
Tárolt vér és tartósítószer EDTA. Az egyes laboratóriumi elemzések során az anyag előkészítésének egyedi jellemzői vannak, amelyekkel a szakértők ismerik.
Innovatív diagnosztikai módszerek
A fertőzés korai felismerése lehetővé teszi a korai kemoprofilaxist, a súlyos betegségek megelőzését.
A klinika gyermekkorban történő törlése, elégtelen vizsgálati eredmények, a minták értékelésének írástudatlan értelmezése nem teszi lehetővé a fertőzés időben történő ellenőrzését. A csecsemők morbiditásának megakadályozásához az eredmények gondos elemzése szükséges, a diagnózis korai szakaszában történő megállapításának lehetőségével.
A tuberkulózis laboratóriumi diagnózisának modern módszere a gyermekeknél - a TAB-TM kimutatása
A „TAB-TM” nevű gyermekekben a T-sejt markerek meghatározására adott reakciót nagy érzékenység jellemzi. A módszer lényege a T-limfociták felszínén lokalizált specifikus differenciálódási klaszter (CD-27) azonosítása. E faktor izolálása után a citokineket citometriával festjük.
A módszert az irodalomban írták le 2014 óta. A megfigyelések eredményei az eljárás nagy érzékenységét mutatják. A TAB-TM meghatározása kifejezett módszer a tuberkulózis sputumvizsgálattal történő diagnosztizálására.
A tuberkulózis vérvizsgálata - ami azt mutatja
A kezdeti szakaszban a tuberkulózisfertőzés specifikus klinikai tünetek nélkül jelentkezik. A gyermekkori laboratóriumi diagnózis akkor válik lehetővé, amikor a Koch pálca szaporodik.
Milyen sejteket értékeltek a tuberkuláris folyamatban laboratóriumi vérvizsgálatban:
- A vörösvérsejtek olyan vörösvérsejtek, amelyek felelősek az oxigén szállítására a szövetekben. A vér vörös csíráinak oldalán a tüdő tuberkulózis könnyű lefolyása miatt nincsenek kóros változások. A romboló fókusz jelenléte hozzájárul a véres vérzéshez. Az állapot a bélfal tuberkulózis gyulladásával alakul ki. A patológia hátterében lévő retikulociták száma több mint 1% -kal nő;
- A leukociták bármilyen fertőzéssel nőnek. A leukocitózist a leukogram balra történő eltolódása kíséri. A szegmentált neutrofilek számának növekedését a kezdeti szakaszban lehet nyomon követni. Súlyos tuberkulózisban, plasztikus fúzióval, immunhiányos állapotokban leukopeniát figyeltek meg (a vérleukociták számának csökkenése). Ugyanakkor növeli a limfociták tartalmát (több mint 20%);
- Az eozinofília a kezdeti szakaszhoz vezethető. Az állapot akkor fordul elő, amikor különböző szervek tuberkuláris infiltrátumai vannak. A felnőttekben súlyos bomlással járó súlyos tuberkulózis az eozinofilek teljes hiányát eredményezi;
- Basophil javítása.
A tuberkulózis laboratóriumi vizsgálata nem specifikus gyermekekre vagy felnőttekre. Az ilyen változások számos bakteriális vagy vírusos fertőzésre jellemzőek.
A hemogram indikátorok a tuberkulózisfertőzés stádiumának meghatározására szolgálnak a TB-szakemberek számára.
Aktív infiltrációval a leukocitózis nyomon követhető a neutrofilek számának növekedése miatt. A sejtekben patológiai szemcsék jelennek meg, ami a vér mérgezését jelzi.
A szétesés központjai az eozinofilek, a neutrofilek, a fiatal formák, a limfociták számának csökkenéséhez vezetnek. A terjesztés során abszolút monocitózis lép fel. A reszorpció hátterében a limfociták és az eozinofilek száma nő.
A központok konszolidálásakor a hemogramot nem a változások jellemzik.
A tuberkulózis gyermekvizsgálata: tuberkulin diagnózis
Hosszú ideig a pthisiatricians színpadra lépett Mantoux reakciót. Az ilyen tuberkulózisvizsgálatok lehetővé tették nemcsak az aktív fertőzés, hanem a fertőzés kimutatását is. A minta lényege a tuberkulin szubkután injekciója volt, amely a szervezet allergiáját okozza. A tészta a Micobacterium Bovis-tól kapott anyagot használt. Szubkután injekció beadása után papulát kapunk, amely tükrözi a szervezet válaszát a mikobaktériumok behatolására:
- Normál papula - 5-16 mm-es méret;
- Reakció hiányában - az immunrendszer gyengülése, a mikobaktériumok hiánya;
- Nagy papulus - a baktériumok antigének jelenléte, érintkezve a tubercle bacilli hordozójával.
A módszer nem tekinthető megbízhatónak a hamis pozitív reakciók nagy száma miatt. Ha megkérdőjelezhető eredményekre van szükség, a megerősítő PCR. A diaskintest (dst) megjelenésével megváltozott a helyzet. A módszerek együttes használata lehetővé teszi a megbízhatóbb eredmények elérését.
Klasszikus "ftisiológiai" módszerek a tuberkulózis diagnosztizálására
A gyerekek és felnőttek tuberkulózisának diagnosztizálására szolgáló phtisiatrológusok a következő vizsgálatokat végzik:
- A beteg előzményeinek vizsgálata (érintkezés a pácienssel vagy a tubercle bacillus hordozójával). A társadalmi kockázati tényezők azonosítása segíthet a lehetséges fertőzésekben;
- A tuberkulin érzékenységének értékelése (Mantoux teszt) PPD tuberkulinnal 5-10 TE dózisban. Az eredmény értékelése 48-72 óra alatt történik;
- A röntgenvizsgálatot gyanús tuberkulózisban szenvedő gyermekeknél és felnőtteknél, a tuberkulin tesztek kanyarban végzik;
- A bakteriológiai kultúra a Mycobacterium tuberculosis által okozott fertőzés vitathatatlan bizonyítéka. Megfelelő köpetgyűjtéssel a kórokozó kimutatása a gyomor mosásában, a tuberkulózis vizsgálata pozitívnak tekinthető. Koch pálcája megtalálható gennyes tályogokban, nyirokcsomókban, aszcitikus effúzióban, pleurális exudátumban, vizeletben, cerebrospinális folyadékban;
- A vörösvértestek üledési sebessége minden fertőzéssel - beleértve a tuberkulózist is - nő;
- A PCR lehetővé teszi egy specifikus kórokozó azonosítását, de a vizsgálat költséges;
- A Diaskintest meghatározza a pulmonális tuberkulózist, de gyakran negatív eredményt ad a fertőzés extrapulmonális lokalizációjában.
A tuberkulózis modern diagnosztikája egy komplex módszer alkalmazásával lehetővé teszi a testben található mycobacteriumok nagyfokú megbízhatósággal történő meghatározását. A meglévő módszerek segítségével aktív folyamat vagy fertőzés észlelhető. Csak időre van szükségünk, hogy kapcsolatba lépjünk a szakértőkkel!
Mi a PCR-analízis a tuberkulózisra vonatkozóan
Innovatív módszer a mikroorganizmusok kimutatására, amelyet a tudós Cary Mullis talált ki a múlt század végén - PCR-elemzés. Írásaiért megkapta a Nobel-díjat. Teljes mértékben ezt a folyamatot nevezik polimeráz láncreakciónak. A mikroorganizmusok típusának helyreállítása a mellékelt biomateriában rövid DNS-fragmensekkel. Ez lehetővé teszi, hogy a fertőzést korai szakaszban észlelje, és azonnal kezdje el a kezelést anélkül, hogy súlyos tüneteket és szövődményeket okozna.
Mi az elemzés
A PCR által végzett diagnózis a biológiai anyagból származó patogén DNS-szegmensek beszerzése, és a megfelelő láncba való igazítása. Ez lehetővé teszi azon mikroorganizmus azonosítását, amelyhez a sejtek tartoznak.
Az eljárást három szakaszban hajtják végre:
- Biológiai anyagok gyűjtése.
- A DNS azonosítása és összehangolása.
- A fertőzés felismerése.
Ez a tanulmány speciális orvosi felszerelést igényel - erősítő. Fel van szerelve egy kamerával, ahol a vizsgált anyag kölcsönhatásba lép a magas hőmérséklet és a kémiai enzimekkel. A kijáratnál a laboratóriumi technikusnak van egy hosszú DNS-lánca a kórokozónak, ha van az emberi testben.
Hogyan kell felkészülni a diagnózisra?
A PCR-analízis egy komplex géntechnológiai folyamat, amely pontosságot és súlyosságot igényel mind a laboratóriumi technikusoktól, mind a betegektől. Az elemzési eredmények helyességében nagy szerepet játszik az eljárás előkészítése, azaz a megfelelő anyaggyűjtés.
A betegséggel kapcsolatos fő információforrások a következők:
Más opciók is használhatók, szükség esetén folyadékok kerülnek elemzésre különböző szervekből.
A beteg számára vannak olyan szabályok, amelyeket az eljárás előtt kell követni. Vérvizsgálat esetén 8 órával a gyűjtés előtt tilos:
- enni az ételt;
- füstölni;
- alkoholtartalmú italok itatása;
- vegye be a gyógyszert.
Este a köpet összegyűjtése előtt a gyógyszer részeg, hogy vékonyodjon és megkönnyítse az expektorációt. Reggel a szájüreg alapos higiéniája után gyűjtsük össze az anyagot.
A vizeletet egy steril edényben gyűjtjük, reggel, üres gyomorban, mosás után, mielőtt bármilyen gyógyszert szedne.
Ha egy személy antibiotikumot szed, akkor a polimeráz láncreakció elemzését el kell halasztani, különben a PCR eredménye nem megbízható. A sputumot vagy a vért két héttel a kezelés befejezése után kell adni.
Hogyan történik a baktériumok azonosításának folyamata
Röviden, az eljárás a DNS egy részének izolálása. A korszerű géntechnológiai módszerek alkalmazása lehetővé teszi a mikroorganizmusok típusának meghatározását. Továbbá az elemzéshez szükséges anyagnak kis mennyiségre van szüksége.
Technikailag ez egy nagyon bonyolult eljárás, de kevesebb időt vesz igénybe, mint a klasszikus bakteriológiai vizsgálatok. A kórokozóknak nem kell elkülönülniük a bioanyagból, nincs szükség arra, hogy több hétig növekedjen. A kézbesítés napján a beteg már tudja az elemzés eredményét.
A PCR teljes folyamata szakaszonként folytatódik:
- Folyamatban van a DNS elsődleges formája, amely magas hőmérsékleten, közel 100 fokkal két láncra oszlik.
- A hőmérséklet csökken, a szálak kapcsolódnak a nukleinsavfragmensekhez - a primerhez.
- Hosszabbítás történik - a molekuláris szerkezet szintézise.
A teljes munkamenet körülbelül harminc ilyen eljárásból áll, és egy ciklust ismétlünk láncreakcióként. Ez azért szükséges, hogy létrehozzuk azon sejtek számát, amelyekben a kapott baktériumok felismerhetővé válnak.
A tanulmány következtetése
A PCR (polimeráz-láncreakció) eredményének leírása ad egy TB-orvosnak, egyszerű vagy telepített. Az első esetben a leírás csak Koch-botok jelenlétéről vagy hiányáról tartalmaz információt. Ha a dekódolás részletes, a betegség terjedelmét, annak fókuszát kiderítheti. E kritériumok szerint minden esetben meg lehet határozni a tuberkulózis legmegfelelőbb kezelését.
A láncreakció polimeráz elemzése nem tesz különbséget az élő és a halott kórokozók között, és csak a jelenlétükről beszél. Ezért célszerű, ha a tuberkulózis második vizsgálatát csak 3-4 héttel az orvos által előírt terápia után végezzük el.
Ha az eredmény pozitív, akkor a „Mycobacterium tuberculosis” felirat kerül a következtetésre. Negatív eredmény esetén a baktériumok biológiai neve mellett "nincs észlelve" jel. Az elemzések hamis pozitívak lehetnek. Ez ritkán történik - a PCR-vizsgálatok végrehajtásának technikájának megsértése vagy nem életképes mikroorganizmusok jelenléte esetén. A végső következtetést a betegségről csak TB orvos végezheti.
A módszer előnyei
A tuberkulózis PCR diagnosztikája számos okból népszerűvé vált. Sok előnye van, többek között:
- A kutatás pontossága. A technológia elemzésekor a baktériumokat azonosítani lehet, még akkor is, ha kis mennyiségben vannak jelen.
- Gyors eredmény. Az egész folyamat az anyag összegyűjtéséig a befejezésig körülbelül 5 óra. A vetéshez képest több hétig kell várnia.
- Teljes biztonság a személy számára, ellentétben a fluorográfiával a sugárzással.
- Bármilyen folyékony biomateriát használnak. A pulmonalis tuberkulózisban a PCR megvalósításához a köpet adja a legpontosabb információt, a tuberkuláris meningitisben mintát veszünk a gerincvelőből. A vérvizsgálat segít azonosítani a helyi fertőzésfókuszokat.
- A baktériumok antibiotikumokkal szembeni érzékenységét tesztelik. Ez lehetővé teszi a helyes kezelés előírását.
- Korai diagnózis. Ismerje meg a betegség jelenlétét a tünetek megjelenése előtt.
A pozitív szempontok mellett hátrányok is vannak. A fő az ár. A PCR elemzése nem olcsó, ami a drága berendezések használatához kapcsolódik. Egy másik hátránya, hogy a tuberkulózis kezelését követő időszak után meg kell várni az újbóli vizsgálathoz szükséges időt. Néha a teszt eredménye hamis pozitív. Ez a bakteriális mutáció miatt következik be.
Ha PCR szükséges
A pulmonális tuberkulózisra vonatkozó PCR-nek nincs ellenjavallata, és teljesen biztonságos. Ezért vannak bizonyos helyzetek és betegségek, amikor ez az egyetlen lehetőség a kutatásra.
Ezek a következők:
- terhesség
- érintkezés egy tuberkulózisos pácienssel;
- a tüdőbetegségek diagnosztizálásának nehézségei;
- vizsgálat a műtét előtt;
- allergiás reakció;
- HIV-fertőzés;
- fiatal korban.
Használhatja a PCR módszerét a phtisiológia által kiadott irányban, valamint egy gyermekorvos, orvos vagy pulmonológus irányában.
Mi helyettesítheti a tuberkulózis PCR-diagnózisát
Más típusú felmérések nem elavultak, de továbbra is használatosak. Olyan esetekben alkalmazzák, amikor nem lehetséges a tuberkulózisra vonatkozó PCR végrehajtása. Ezenkívül a modern módszer nem ideális, néha a mutatóit megkérdőjelezik, és újra kell vizsgálni.
A következő módszerek segítenek meghatározni a tuberkulózis jelenlétét egy személyben:
- tuberkulin diagnózis (Mantoux);
- mellkas röntgen;
- biológiai anyagok flóra vizsgálatára;
- a tüdő röntgenfelvétele.
Ezek a tanulmányok ingyenesek és mindenki számára elérhetőek. De vannak hátrányaik:
- A tuberkulózis teszt allergiát okoz. A bőrbetegségek ellenjavallt.
- A röntgenvizsgálatokat sugárzás kíséri, amely nem alkalmazható gyermekek, immunhiányos és terhes nők esetében.
- A bakteriológiai vizsgálatok sokkal több időt vesz igénybe, az eredmény akár egy hónapra is vár.
Az alternatívák nem garantálják a száz százalékos helyes következtetést. A leggyakrabban megelőző célokra használják. A legmegbízhatóbb információkat a tuberkulózis PCR-ben történő diagnosztizálása adja. Ha lehetséges, jobb használni.
A gyermekek tuberkulózisának sajátosságai és a PCR szükségessége
A gyermeknek különösen védettnek kell lennie a betegségtől - a tuberkulózisfertőzés súlyos károsodást okozhat a szervezetnek, még nem teljesen kialakult immunitással.
Miután belépett Koch pálcájába a gyermek szervezetébe, a betegség fejlődése a következő lépéseken megy keresztül:
- Látens. Egy évig tart, anélkül, hogy bármilyen tünetet okozna.
- Mérgezés. Érinti az általános egészséget. Gyengeség, apátia, étvágytalanság, álmosság és csökkent teljesítmény. Állandóan enyhén magas hőmérséklet.
- A betegség elsődleges formája. A tuberkulózis lokalizált, a betegség középpontjába kerül. A gyermek köhögés, légszomj, fejfájás, duzzadt nyirokcsomók.
- Tuberkuláris bronchoadenitis. A tünetek a vállpántos fájdalom, a köhögés változó hangmagassággal, zihálás.
Általában a tuberkulint injekciózzák, hogy azonosítsák a fertőzést egy gyermek bőrén. Ha az ilyen típusú vizsgálat ellenjavallt, akkor a tuberkulózisra vonatkozó PCR a diagnózis elengedhetetlen lehetősége. A gyermekek általában vérvizsgálatot végeznek, de szükség esetén a köpet összegyűjtik. A tuberkulózis jelenlétének legkisebb gyanúja esetén további vizsgálatokat végeznek a pozitív eredmény biztosítása érdekében, és azonnal megkezdik a kezelés korai szakaszában, megelőzve a betegség kialakulását.
A modern kutatási módszerek mindig gyorsabbak és megbízhatóbbak. Kár, hogy az ilyen vizsgálatok elvégzéséhez szükséges drága berendezések miatt nem minden orvosi intézményben és településen lehet lehetőség. A vizsgálatot általában az orvos választja, de a betegnek joga van választani. Ha PCR tesztet kellett tennie, mondja el velünk a megjegyzésekben. Ha a cikk hasznos volt az Ön számára, ossza meg a közösségi hálózatokban - talán segíthet a barátaidnak.